[发明专利]一种同时检测他汀侧链及其对映异构体杂质的方法

说明书

本发明公开了一种同时检测他汀侧链及其对映异构体杂质的方法，涉及化学分析技术领域，检测步骤如下：将待测样品与3,5‑二硝基苯甲酰氯进行衍生化反应，萃取反应产物，再用正相高效液相色谱分离、紫外检测，即得。本发明基于他汀侧链在紫外检测器上响应很低，采用3,5‑二硝基苯甲酰氯进行衍生化反应，衍生化时间短，能够增加样品的响应度，提高样品的分离度，从而有效分离检测他汀侧链及其对映异构体，灵敏度高、准确、快速，且该方法简单，可广泛用于他汀侧链中他汀侧链的对映异构体的检测与控制。

技术领域

本发明涉及化学分析技术领域，尤其涉及一种同时检测他汀侧链及其对映异构体杂质的方法。

背景技术

他汀类药物即3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂，其本身或代谢物结构与HMG-CoA相似，因此可于胆固醇合成的早期阶段竞争性的抑制HMG-CoA还原酶的活性(他汀类药物对此酶的亲和力比HMG-CoA强10000倍)，从而使内源性胆固醇的合成减少，降低血浆中总胆固醇的水平。肝脏是内源性胆固醇合成的主要场所[7](约占总量的70％)，由于肝细胞合成胆固醇减少而阻碍了极低密度脂蛋白的合成和释放；同时，通过自身调节机制，代偿性的增加了肝细胞膜上低密度脂蛋白受体的数目、活性以及与低密度脂蛋白的亲和力，使血浆中大量的低密度脂蛋白被摄取，经代谢排出体外，进一步降低了血浆低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇和总胆固醇水平。大量临床证据表明他汀类药物可大幅度降血脂，采用他汀类药物治疗临床获益显著：(1)减少主要冠脉事件；(2)减少冠心病死亡率；(3)减少PCI/CABG需求；(4)减少中风；(5)减少总死亡率。

自从1976年第一个他汀类药物——美伐他汀(mevastatin)在霉菌培养液中被分离，他汀类药物已发展至第三代。第一代用发酵法得到，包括洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)和普伐他汀(pravastatin)；第二代为人工合成的消旋体，代表药物为氟伐他汀(fluvastatin)；第三代为人工合成的对映体，有阿托伐他汀(atorvastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)等。他汀类药物的结构可分为3个部分：一个与酶的底物HMG-CoA中HMG结构类似的的β，δ-二羟基戊酸结构(侧链)；一个与酶变构后产生的疏水性浅沟相结合的疏水性刚性平面结构(主环)；两者之间的连接部分。

以下为几种常见的他汀类药物的结构式。

他汀的合成一般采用主环加侧链的对接汇聚合成路线，CN102311376A公开了一种阿托伐他汀钙的制备工艺，第一步，在正庚烷、四氢呋喃、甲苯组成的混合溶剂中先加入(4R-cis)-6-氨乙基-2,2-二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯(简称ATS-9)与特戊酸反应；第二步，再加入4-氟-α-[2-甲基-1-氧丙基]-γ-氧代-N,β-二苯基苯丁酰胺(简称M-4)，升温反应。CN1687087公开了瑞舒伐他汀及其中间体的制备方法，该方法通过将侧链醛化合物与三苯基磷叶里德试剂化合物进行关键的缩合反应，高产率地制备得到瑞舒伐他汀化合物。因此，侧链的构型直接影响成品的构型。侧链的合成方法在专利文献中被公开，CN1876644A公开了一种(4R-cis)-6-甲酰基-2,2-二甲基-1,3-二氧己环-4-乙酸叔丁酯的合成方法，CN102180862A公开了一种(4R-cis)-6-取代-2,2-二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯的制备方法；CN105132477A公开了一种(4R-cis)-6-氯甲基-2，2-二甲基-1，3-二氧六环-4-乙酸异丙酯的制备方法；CN105503816A公开了一种固体(4R-cis)-6-甲酰基-2,2-二甲基-1,3-二氧己环-4-乙酸叔丁酯的制备方法。但是如何对侧链的异构体构型进行分离检测，尚无报道。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种同时检测他汀侧链及其对映异构体杂质的方法，采用3,5-二硝基苯甲酰氯对样品进行衍生化反应，再用正相高效液相色谱分离、紫外检测，该方法简单、准确，灵敏度高。