[发明专利]一种大豆耐盐性复合筛选与鉴定方法

权利要求书

1.一种大豆耐盐性复合筛选与鉴定方法，其特征在于,包括以下步骤：

1）发芽期筛选：在播种杯内装填蛭石以作固定基质，播种后将一定数量播种杯共同置入适宜大小的筛选容器中，浇入发芽期适宜盐分浓度的筛选溶液，盐胁迫条件下筛选处理，筛选期间以水位保持法精确控制盐分浓度不变；筛选结束后，统计种子出苗情况，未出苗的为敏感类型；出苗但生长滞缓，植株矮小的为中抗类型； 出苗且生长明显较快，株高较高的为高抗类型；筛选获得的中抗及高抗材料，在发芽期筛选结束后，撤去盐分，过渡恢复培养至植株小苗处于三叶期时，继续进行步骤2）；

2）苗期筛选：发芽期筛选后，停止浇溶液，控干处理；称重法换算杯内蛭石所含水分体积并将其纳入筛选溶液总体积之中，计算并配制苗期适宜盐分浓度筛选液；盐胁迫处理同发芽期，水位保持法精确控制盐分浓度；筛选后统计小苗生长情况，植株枯死的为敏感类型；仍有少部分叶片为绿色的为中抗；大部分叶片持绿，茎干挺直的为高抗；

其中，所述水位保持法是指浇入溶液后，静置一段时间使蛭石充分吸收溶液至饱和，筛选容器内液面稳定后，在容器内壁标注水位线，在筛选期间注意补充清水使水位始终保持不变，以达到维持盐分浓度不变的目的；

所述称重法换算播种杯内水分体积及苗期筛选相关参数计算如下： a) 称重法换算播种杯内蛭石含水量：控干处理后播种杯及内容物湿重（W_湿重）与播种杯及杯内装填蛭石、种子总干重（W_干重）之差，即为杯内剩余水分含量； ①V_含水=（W_湿重- W_干重）/ρ_水；其中，V_含水：播种杯内蛭石含水体积，ρ_水：水的密度； b)苗期筛选其它相关参数计算公式： ② V_总=V_外液+V_含水 ③V_外液=V_清水+V_母液 ④V_母液=V_总*C_终/C_母； ⑤ V_清水= V_外液- V_母液其中，V_总：筛选溶液总体积、

V_外液：筛选容器中播种杯外需添加的溶液体积、

V_母液：配制筛选外液所需的母液体积、

V_清水：配制筛选外液所需的清水体积、

C_终：浇入外液，播种杯内外水盐平衡后筛选液最终的盐浓度、

C_母：母液盐浓度配制特定浓度筛选溶液，先计算其对应母液及清水所需体积，然后量取所需母液、清水，混合均匀；

经复合筛选后获得的后代种子，重复进行发芽期和苗期复合筛选，直至获得不同盐胁迫抗性且能稳定遗传的系列材料。

2.如权利要求1所述的一种大豆耐盐性复合筛选与鉴定方法，其特征在于，在筛选之前需对待筛选材料分别进行发芽期和苗期致死浓度预实验，盐溶液设定为从低到高的不同浓度梯度，以最敏感材料的致死浓度为适宜筛选浓度。