[发明专利]一种高效快速制备游离虾青素的方法

权利要求书

1.一种高效快速制备游离虾青素的方法，其特征在于，按照如下步骤进行：

（1）将铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）甘油菌接种到种子培养液中，35-40℃摇床培养12-48h，然后将0.5-2.0%的种子培养液接种到发酵培养基中，35-40℃摇床震荡培养36-72h；

（2）将培养后的发酵液取出，2-6℃条件下离心处理6-15min，保留上清，去除沉淀，将上清置于-80℃预冻后，放入冷冻干燥机中，冻干后取出酶粉放入干燥器中保藏备用；

（3）取雨生红球藻，用无水乙醇溶解，加入步骤（2）制备的冻干后的酶粉，溶解于pH为8.5-9.5的缓冲液中，加入到反应容器中，充氮气，避光在35-40℃条件下反应20-40min；

（4）采用有机溶剂萃取制备游离虾青素。

2.根据权利要求1所述高效快速制备游离虾青素的方法，其特征在于，所述种子培养液由如下重量百分比的物质组成：蛋白胨，1.0%；酵母粉，0.5%；NaCl，1.0%；水，100mL；调pH7.0；121℃灭菌20min。

3.根据权利要求1所述高效快速制备游离虾青素的方法，其特征在于，所述发酵培养基由如下重量百分比的物质组成：蛋白胨，1.0%；酵母粉，0.5%；NaCl，1.0%；水，1L；调pH 7.0；121℃灭菌20min。

4.根据权利要求1所述高效快速制备游离虾青素的方法，其特征在于，步骤（3）所述无水乙醇与缓冲液的体积比为1:（8-16）。

5.根据权利要求1所述高效快速制备游离虾青素的方法，其特征在于，所述缓冲液为甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液。

6.根据权利要求1所述高效快速制备游离虾青素的方法，其特征在于，所述步骤（4）有机溶剂为乙酸乙酯：乙醇混合物。

7.根据权利要求1所述高效快速制备游离虾青素的方法，其特征在于，步骤（2）所述离心的速率为5439×g。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）所述缓冲液中加入黄芪苷。