[发明专利]一种E-选择素肽配体修饰的靶向热敏脂质体的制备和应用

说明书

本发明涉及一种E‑选择素多肽配体修饰的肿瘤靶向脂质体制备方法及应用，所述的靶向脂质体由磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇‑马来酰亚胺‑E选择素肽配体偶联物、二棕榈酰磷脂酰胆碱、培化磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻酰溶血卵磷脂制备得到。其中涉及的偶联物DSPE‑PEG‑Mal‑8CR由E‑选择素肽配体8‑CR与磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇‑马来酰亚胺进行化学偶联合成，本发明制备的肿瘤靶向长循环热敏脂质体，包载不同的抗肿瘤药物后可以主动靶向于肿瘤新生血管并能够抑制肿瘤细胞的迁移，对应对肿瘤的转移和复发有着重要意义。

技术领域

本发明属于生物医药制剂技术领域，涉及E选择素配体可与肿瘤细胞竞争结合E选择素从而阻断或抑制肿瘤细胞的迁移，特别涉及一种E-选择素肽类配体修饰的靶向热敏脂质体的制备和在抗肿瘤方面的应用。

技术背景

E-选择素可特异性识别肿瘤细胞表面的某些糖蛋白和糖脂分子的末端结构域，通过这种识别作用介导的E-选择素与肿瘤细胞间的作用，可使肿瘤细胞在内皮细胞黏附，继而随血流发生迁移，导致肿瘤细胞的扩散迁移。

E-选择素天然配体的结构特征仍未被完全阐明，有研究认为其特异性识别的天然配体可能包含糖类、肽类等多种结构类型，目前被广泛接受的E-选择素的主要天然配体结构为路易斯酸化的四聚糖结构sLex，理论上E-选择素的特异性配体可以作为靶向分子将其它抗肿瘤药物带到肿瘤部位，同时还可以发挥该配体对肿瘤细胞迁移的抑制作用，因此设计和合成与E-选择素结合的化合物可以起到肿瘤靶向和抑制肿瘤转移的双重作用。

纳米技术与生物技术的融合，使纳米生物技术在近几年获得了重要的进展。脂质体作为一种较成熟的纳米药物载体，具备一些独特的作用特点，脂质体是一种靶向药物载体，它可以通过纳米粒子的EPR效应被动靶向于肿瘤部位，减少药物在正常组织的分布，从而提高药物治疗效果，降低药物毒性作用。

目前各种不同方式修饰改良的脂质体不断被报道，例如制备热敏感的脂质体，聚乙二醇(PEG)修饰的脂质体等，这些脂质体通常具有较少的副作用，PEG化后还可显著延长血液循环时间和增加肿瘤组织的药物积聚。同时在脂质体表面还可以进行多种修饰，例如连接不同种类的靶向分子，进一步增加药物对肿瘤部位的靶向作用。但目前尚没有可以在上述基础上能同时解决肿瘤细胞转移问题的靶向脂质体，而肿瘤的转移又恰恰是目前肿瘤致死的最重要原因，本发明所设计制备的靶向脂质体不但可将药物靶向至肿瘤部位，还可以抑制由E-选择素所介导的肿瘤转移，因此具有明显的创新性和创造性。

发明内容

本发明的目的是提供用于治疗肿瘤及肿瘤转移的功能性脂质体的制备方法，本发明将E-选择素的肽配体修饰至DSPE-PEG-Mal表面，然后用于制备一种靶向脂质体，可以用作药物载体包载各种不同的药物，如以紫杉醇为药物模型，将热敏脂质体与主动靶向技术相结合，提高热敏脂质体的靶向性，降低药物的毒副作用，从而达到增强热敏脂质体的抗肿瘤效果的目的，同时抑制肿瘤的转移。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种E-选择素的肽配体修饰的靶向脂质体载药系统，含有磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺-E-选择素肽配体偶联物、二棕榈酰磷脂酰胆碱、培化磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻酰溶血卵磷脂。

而且，所述E-选择素肽配体在肽配体基础上在其氨基端或羧基端分别添加半胱氨酸作为连接桥。

而且，所述E-选择素肽配体包括额瓶体的各种反序形式和D型氨基酸序列形式，CIELLQAR,IELLQARC,CRAQLLEI,RAQLLEIC,(D)-CIELLQAR,(D)-IELLQARC,(D)-CRAQLLEI,(D)-RAQLLEIC。

而且，其中所述抗肿瘤药物为紫杉醇、阿霉素、多西紫杉醇、多柔比星或奥沙利铂。

而且，所述二棕榈酰磷脂酰胆碱、培化磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻酰溶血卵磷脂、磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺-E-选择素肽配体偶联物质量比为80～85：5～10：1～5：5～10。