[发明专利]一种基于磷光铜纳米簇检测胰蛋白酶及其抑制剂的方法有效
| 申请号： | 201810489084.8 | 申请日： | 2018-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN108760696B | 公开（公告）日： | 2021-02-09 |
| 发明（设计）人： | 刘金华;慈乔乔;张倩晨;张承武;李林 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 吴频梅 |
| 地址： | 210009 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 磷光 纳米 检测 胰蛋白酶 及其 抑制剂 方法 | ||
1.一种基于磷光铜纳米簇检测胰蛋白酶的方法，其特征在于：包括如下步骤：取DMF和去离子水配置混合溶液，DMF/水体积比例为2：1，将20 μL谷胱甘肽0.2 M加入到480 μL混合溶剂中，轻轻摇晃至均匀，取硫酸铜溶液加入玻璃瓶，使混合溶液中铜离子浓度为500 μM，放入20 ℃振荡箱，慢速搅拌震荡1分钟，形成磷光铜纳米簇，配置细胞色素C于1 mL离心管中，取不同浓度胰蛋白酶加入细胞色素C总体积为500 μL，混合溶液中胰蛋白酶浓度梯度为0-1 mg/mL，细胞色素C浓度为3 mg/mL，放入振荡箱37 ℃孵化0.5-2小时，取孵化后胰蛋白酶和细胞色素C 混合溶液20 μL加入铜纳米簇，充分振荡，室温放置0.5-2小时，不同浓度胰蛋白酶水解后的细胞色素C降低铜纳米簇荧光，荧光强度不同，以此定量检测胰蛋白酶。
2.一种基于磷光铜纳米簇检测胰蛋白酶抑制剂的方法，其特征在于：取DMF和去离子水配置混合溶液，DMF/水体积比例为2：1，将20 μL谷胱甘肽0.2 M加入到480 μL混合溶剂中，轻轻摇晃至均匀，取硫酸铜溶液加入玻璃瓶，使混合溶液中铜离子浓度为500 μM，放入20℃振荡箱，慢速搅拌震荡1分钟，形成磷光铜纳米簇，配置细胞色素C于1mL离心管中，取胰蛋白酶与不同浓度胰蛋白酶抑制剂加入细胞色素C，总体积为500 μL，混合溶液中胰蛋白酶浓度为1 mg/mL，胰蛋白酶抑制剂浓度梯度为0-2μg/mL，细胞色素C浓度为3 mg/mL，放入振荡箱37 ℃ 孵化0.5-2小时，取孵化后胰蛋白酶、细胞色素C和胰蛋白酶抑制剂混合溶液 20 μL加入铜纳米簇，充分振荡，室温放置0.5-2小时，胰蛋白酶受到不同浓度抑制剂的抑制作用，水解后的细胞色素C降低铜纳米簇荧光，荧光强度不同，以此检测胰蛋白酶抑制剂能力。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京工业大学，未经南京工业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810489084.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
