[发明专利]叶酸靶向还原敏感载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种叶酸靶向还原敏感载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用。该递送载体是以两亲性三嵌段共聚物PCL‑ss‑PEG‑ss‑PCL为材料制备，并将化疗药物阿霉素与光敏剂吲哚菁绿包载于该胶束的疏水内核中，同时在制备过程中引入具有活性基团的磷脂DSPE‑PEG‑NH₂，该磷脂的DSPE端疏水性较强会插入到聚合物胶束的疏水性PCL内核中，柔顺的亲水性PEG长链在胶束的外表面，将具有靶向作用的FA连接在聚合物胶束表面的PEG活性远端，集主动靶向肿瘤、还原响应释药功能于一体。本发明具有粒径小、分散性好、载药量、包封率高和较好的光热转换效应的优点，可实现还原触发释药、荧光成像肿瘤部位、肿瘤靶向给药、化疗‑光热联合治疗提高抑瘤效果，在肿瘤的靶向联合治疗方面具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种叶酸靶向还原敏感载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用，具体是叶酸介导、可对肿瘤微环境具有还原响应的靶向聚合物胶束，其能高效在聚合物胶束内核包载化疗药物及光敏剂，并具有长循环特性、可高效进入肿瘤细胞，实现还原敏感触发释放药物及肿瘤的化疗-光热联合治疗。

背景技术

聚合物胶束发展于30年前，是由两亲性聚合物在选择性溶剂中，由于分子间的氢键、静电作用和范德华力而自发组装形成的一种热力学稳定的胶体溶液，具有核壳结构，其亲水性嵌段形成外壳，疏水性嵌段形成内核。作为一种高效的药物载体，聚合物胶束可以将疏水性药物包在疏水性内核中，降低其对人体的毒副作用，亲水性外壳可提高药物的稳定性，并影响胶束的体内外行为。用于构建聚合物胶束疏水性内核的常用疏水性链段有聚乳酸（PLA）、聚己内酯（PCL）、聚天冬氨酸、聚谷氨酸、聚氧丙烯等。亲水性外壳所选用的亲水链段直接影响聚合物胶束的生物相容性及生物动力学等性质，常用的是具有优良生物相容性和安全性的聚乙二醇（PEG），其他亲水链段还有聚赖氨酸、聚氧乙烯、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸类等。聚合物胶束粒径一般小于200 nm，具有稳定性好、载药范围广、载药量高、体内滞留时间长、药物稳定性好、毒副作用低和生物利用度高等特点。

叶酸（Folic acid）属于小分子维生素，生理条件下难透过细胞膜，需要经过内化才能被吸收。现存在两种叶酸内化的机制：一是通过低亲和力的跨膜蛋白，转运叶酸得到还原态进入细胞内；二是通过高亲和力的叶酸受体，可吸收叶酸进入细胞内。叶酸受体（FR）为一种糖蛋白膜受体，在正常组织内低表达，而在某些实体肿瘤细胞膜表面高度表达，对叶酸或叶酸的偶联物有较高的亲和力，因此可介导含叶酸或叶酸偶联物的载体进入肿瘤细胞内。将叶酸连接到聚合物胶束表面，利用其与叶酸受体特异性结合的特点，使聚合物胶束具备靶向肿瘤细胞的特性，从而降低毒副作用并提高肿瘤药物在体内的生物利用度。

为了提高药物递送系统的肿瘤靶向效率，不仅需要寻找特异性的靶向配体，还需要增强纳米粒的体内循环稳定性，减少化疗药物在非靶部位的泄露、蓄积，从而降低其毒副反应。肿瘤细胞微环境存在pH、氧化还原特性、温度或酶的不同变化特性，因此很多研究者设计环境敏感的药物递送载体。在动物和人体的细胞内，谷胱甘肽（Glutathione，GSH）是最丰富的低分子生物活性巯基物质，也是最主要的还原物质。细胞内还原性GSH 的浓度为2-10 mM，要比细胞外（2-20 μM）高数百倍。肿瘤组织GSH 的含量则至少是正常组织的4 倍多。特别是在一些耐药肿瘤中，过表达的GSH 甚至要高出10 倍。利用这一特性，可以设计具有GSH触发的药物递送系统，使其在体内循环具有稳定性，而到达肿瘤局部或进入肿瘤细胞后，高浓度GSH触发药物释放可显著提高药物对肿瘤的杀伤作用并降低对正常组织的毒副作用。