[发明专利]用于鉴别紫海胆-中间球海胆杂交种的PCR引物及鉴别方法有效
| 申请号： | 201810493591.9 | 申请日： | 2018-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN108411002B | 公开（公告）日： | 2021-07-13 |
| 发明（设计）人： | 常亚青;湛垚垚;孙景贤;张伟杰 | 申请（专利权）人： | 大连海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人： | 闪红霞 |
| 地址： | 116023 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 鉴别 海胆 中间 杂交种 pcr 引物 鉴别方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于区分紫海胆与紫海胆-中间球海胆杂交种的PCR引物，其特征在于核苷酸序列如下：
上游引物：5' ttttatctcctccctttttatytct 3'
下游引物：5' cctcwaaagtagttaagattgggac 3'。
2.一种应用权利要求1所述PCR引物区分紫海胆与紫海胆-中间球海胆杂交种的方法，其特征在于依次按照如下步骤进行：
a. 提取具有紫海胆外形的待区分海胆个体DNA；
b. 将提取的DNA稀释至10 ng/μl为模板，以上游引物及下游引物进行PCR扩增，所述PCR反应条件为： 94℃ 5min；94℃ 30s、50℃ 30s、72℃ 2min，35个循环；72℃ 5min；
c. 对PCR扩增产物进行电泳，出条带则为紫海胆-中间球海胆杂交种，不出条带则为紫海胆。
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