[发明专利]一种生物素的检测方法

说明书

本发明公开了一种生物素的检测方法，包括以下步骤：a.取CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N‑AuCl₄复合物，加入到PBS缓冲溶液中，再加入标准生物素形成不同浓度的标准生物素溶液，混合均匀后加入比色皿中，记录在267nm波长处的吸光度值，绘制标准曲线；b.取CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N‑AuCl₄复合物，加入到PBS缓冲溶液中，再加入待检测的生物素样品，混合均匀后加入比色皿中，记录267nm波长处的吸光度，通过标准工作曲线，计算得到待检测的生物素样品的浓度。本发明的检测方法，直接利用氯金酸和CTAB的复合物，无需复杂的合成工艺，操作简单；无需借助亲和素或链霉亲和素等价格昂贵的试剂；不需要昂贵的分析仪器；利用紫外区间的光谱进行分析，避免了因发酵液本身颜色而产生的干扰。

技术领域

本发明涉及一种生物素的检测方法，尤其涉及一种可快速、准确、灵敏的检测生物素的方法，属于生物传感领域。

背景技术

生物素作为B族类维生素，参与机体的多种新陈代谢活动，被广泛应用于食品、医药、饲料、发酵等领域，对工农业生产和人们的日常生活产生了重要的影响。通过检测生物素的含量可以对有关生物素的工农业生产加以指导，实现产品的最优化，维护人们的健康。目前，国内外关于生物素的检测方法主要有微生物法、高效液相色谱法、酶联免疫分析法、光谱法和电化学法等。然而，微生物法准确度差且整个操作流程费时、费力；高效液相色谱法所需仪器和试剂昂贵且样品处理过程较为复杂，对研究人员的技术要求较高；基于生物素和亲和素特异性结合的酶联免疫法和光谱法虽然操作简单、分析速度快且准确度高，但是这类方法所用的试剂亲和素或链霉亲和素市场造价较高，难以在生产上进行推广应用。因此，研发一种便宜、简单、快速、准确、灵敏的生物素检测方法具有重要的意义。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一种快速、准确、灵敏且成本低的生物素的检测方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种生物素的检测方法，包括以下步骤：

一种生物素的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

a.取0.1～2mL的CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄复合物，加入到3mL0.01M的PBS缓冲溶液中，再加入标准生物素形成不同浓度的标准生物素溶液，混合均匀后加入比色皿中，记录不同浓度的标准生物素溶液在267nm波长处的吸光度值，以267nm波长处吸光度A的变化值和生物素的浓度绘制标准曲线；

b.取0.1～2mL的CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄复合物，加入到3mL0.01M的PBS缓冲溶液中，再加入待检测的生物素样品，混合均匀后加入比色皿中，记录267nm波长处的吸光度，通过标准工作曲线，计算得到待检测的生物素样品的浓度。

或者：包括以下步骤：

a.取0.1～2mL的CH₃(CH₂)₁₅(CH₃)₃N-AuCl₄复合物，加入到3mL0.01M的PBS缓冲溶液中，混合均匀后加入比色皿中，得到500～200nm波长范围的吸收光谱，作为基线；