[发明专利]一种蛹虫草培养方法

权利要求书

1.一种蛹虫草培养方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)将0-4℃保存的蛹虫草菌种进行VB₁斜面菌种培养：

A、配制蛹虫草菌种培养基：将按照重量份计的200份土豆切成0.8-1.2cm的小块，在沸水中煮20分钟，然后进行过滤，取汁，后加入葡萄糖20份，硫酸镁0.5份，磷酸二氢钾1份，维生素B₁0.01份，琼脂20份，融化后，定容成1000mL，即得，自然pH值；

B、蛹虫草菌种培养基分装，灭菌：

将配制好的蛹虫草菌种培养基分装于18mm×180mm试管中，封口，在121℃条件下，灭菌20min；

C、冷却，接种：

灭完菌后取出蛹虫草菌种培养基，自然冷却至20℃-30℃，在无菌条件下，接入蛹虫草菌种；

D、培养：

将接好种的蛹虫草菌种培养基置于恒温培养箱里，22-25℃培养4-8天，菌丝充分生长；

E、挑选：

将长势好没有出现退化现象的蛹虫草VB₁斜面菌种选出；

(2)接种：

将蛹虫草VB₁斜面菌种在无菌操作下接种到蛹虫草液体菌种培养基上，在温度为20℃、转速为150-160r/min的摇床中培养5d，将液体发酵好的菌种接种到富铬培养基上，每瓶接种量为20mL；所述富铬培养基的组成按照重量份计为：燕麦30份、CrCl₃ 0.6份、磷酸二氢钾1份，水50份；所述富铬培养基中CrCl₃的浓度为0.6μg/mL；

(3)富铬培养：

富铬培养的条件为：将蛹虫草液体接入冷却后的富铬培养基后，置于恒温培养箱里，20℃培养10天，菌丝充分生长后，进行机械骚菌，然后转移到18℃、相对湿度90％、光照强度200勒克斯条件下每天光照12小时，培养15天，待子实体长到10cm时用镊子采出，去掉子实体连接的培养基进行子实体的采收。

2.根据权利要求1所述的蛹虫草培养方法，其特征在于，步骤(2)所述液体菌种培养基的组成按照重量份计为：土豆200份，葡萄糖20份，硫酸镁0.5份，磷酸二氢钾1份，维生素B₁0.01份，水1000份。

3.根据权利要求1所述的蛹虫草培养方法，其特征在于，步骤(2)所述蛹虫草液体菌种培养基装入容量为每瓶250mL，然后121℃灭菌30min、冷却接种，每瓶接液体菌种20mL。

4.根据权利要求1所述的蛹虫草培养方法，其特征在于，步骤(2)所述富铬培养基在配制好后分装于500ml罐头瓶中，食用菌专用封口膜封口，在121℃条件下灭菌20分钟；灭完菌后取出盛放富铬培养基的罐头瓶，自然冷却至20℃-30℃。