[发明专利]大量扣囊复膜酵母的制备方法

权利要求书

1.大量扣囊复膜酵母单细胞孢子体的制备方法，其特征在于，步骤为：以小麦面粉为扣囊复膜酵母的培养原料，将经过培养后的扣囊复膜酵母培养液与面粉按照比例混匀后，揉捏或压制成扁平状，然后置于恒温条件下培养，收集面块表面的白色粉状物，即可获得扣囊复膜酵母；

具体步骤为：

（1）扣囊复膜孢酵母培养液制备：

第一步、种子培养基制备：取酵母粉10g，蛋白胨粉20g，葡萄糖20g，蒸馏水1L，高压蒸汽灭菌121℃，15min，得到种子液体培养基；

第二步、种子制备： 取出低温甘油保存的扣囊复膜酵母菌种，到液体培养基进行活化，30℃，培养12h，然后接种于新鲜液体种子培养基内，30℃，培养40-45h，得到对数期的种子培养液；

第三步、种子扩大培养：将获得的种子培养液进行扩大培养，按照1：10的比例扩大，再吸取种子培养液到新鲜的液体种子培养基内，放在恒温振荡培养箱内30℃，150rpm，振荡培养38-40h，得到对数期的扣囊复膜孢酵母培养液；

（2）将扣囊复膜孢酵母培养液与面粉按比例混合成面絮后，反复揉捏成表面光滑的面团，然后用表面光滑的铁盘将面团压制成厚度为0.5-1.5cm的扁平面块；其中扣囊复膜酵母培养液与面粉的比例为：1mL扣囊复膜酵母培养液加入1.5-2.0g面粉；

（3）扣囊复膜酵母单细胞孢子体的获得：

将扁平面块平铺于无菌的容器内，用保鲜膜覆于容器上，于30℃培养48h后，用灭菌刀片收集面块表面的白色粉状物，即为扣囊复膜酵母单细胞孢子体。

2.如权利要求1所述的大量扣囊复膜酵母单细胞孢子体的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中葡萄糖需单独灭菌后加入。

3.如权利要求1所述的大量扣囊复膜酵母单细胞孢子体的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）和步骤（3）均在无菌条件下进行。