[发明专利]大量扣囊复膜酵母的制备方法

说明书

本发明涉及生物工程领域，特别是指大量扣囊复膜酵母的制备方法。步骤为：以小麦面粉为扣囊复膜酵母的培养原料，将经过培养后的扣囊复膜酵母菌液与面粉按照比例混匀后，揉捏或压制成扁平状，然后置于恒温条件下培养，收集面块表面的白色粉状物，即可获得扣囊复膜酵母。本发明提供一种简便有效的扣囊复膜酵母发酵生产方法，此方法可以大批量生产扣囊复膜酵母，使用原料简单，操作方法简便，可直接发酵得到酵母菌粉，无需进行干燥处理，菌粉含水率在9.87%左右；所得扣囊复膜酵母为酵母细胞个体，非酵母假菌丝。

技术领域

本发明涉及生物工程领域，特别是指大量扣囊复膜酵母的制备方法。

背景技术

扣囊复膜酵母菌是子囊菌属的一个种，能分泌大量的淀粉酶、酸性蛋白酶、β-葡糖苷酶，可直接将淀粉加工成各种产品，无需液化、糖化，降低成本，节约能源，在发酵行业、医药行业和生物能源工业具有潜在的应用价值。但针对其大规模生产方面的研究较少。常规的平板发酵法虽然能获得一定浓度的菌泥，但是，仍存在以下不足：①需要在固体平板上培养，不适合大批量生产；②获得菌泥后，需要再进行干燥处理，操作较复杂；③最终得到的扣囊复膜孢酵母多为假菌丝状态。

随着其应用价值的发掘，人们对扣囊复膜酵母的需求量越来越大，因此急需探索出一种大批量生产扣囊复膜酵母的方法。

发明内容

本发明提出一种大量扣囊复膜酵母的制备方法，解决了现有技术中扣囊复膜孢酵母不能大量工业化生产、假菌丝状态的扣囊复膜孢酵母影响扣囊复膜酵母质量的技术问题。

本发明的技术方案是这样实现的：

大量扣囊复膜酵母的制备方法，步骤为：以小麦面粉为扣囊复膜酵母的培养原料，将经过培养后的扣囊复膜酵母菌液与面粉按照比例混匀后，揉捏或压制成扁平状，然后置于恒温条件下培养，收集面块表面的白色粉状物，即可获得扣囊复膜酵母。

所述扣囊复膜酵母菌液与面粉的比例为：1mL扣囊复膜酵母菌液加入1.5-2.5g面粉。

大量扣囊复膜酵母的制备方法，具体步骤为：

（1）扣囊复膜酵母菌液制备

将低温下保存的扣囊复膜酵母菌取出，在无菌操作台内，将其涂布在固体平板培养基上，置于30℃培养箱内，倒置培养48h后，平板表面长出菌落；挑取扣囊复膜酵母单克隆于液体培养基内，30℃静止培养48h后，获得扣囊复膜酵母菌液；

（2）将扣囊复膜酵母菌液与面粉按比例混合成面絮后，反复揉捏成表面光滑的面团，然后用表面光滑的铁盘将面团压制成厚度为0.5-1.5cm的扁平面块；

（3）扣囊复膜酵母的获得

将扁平面块平铺于无菌的容器内，用保鲜膜覆于容器上，于30℃培养24h-48h后，用灭菌刀片收集面块表面的白色粉状物，即为扣囊复膜酵母。

所述步骤（1）中固体平板培养基的配方为酵母粉10g、蛋白胨粉20g、无水葡萄糖20g、琼脂粉16g、蒸馏水1L。

所述步骤（1）中液体培养基的配方为酵母粉10g、蛋白胨粉20g、无水葡萄糖20g、蒸馏水1L。

所述步骤（2）中扣囊复膜酵母菌液与面粉的比例为：1mL扣囊复膜酵母菌液加入1.5-2.5g面粉。

所述步骤（2）和步骤（3）均在无菌条件下进行。

本发明的有益效果在于：