[发明专利]一种香樟SSR引物组合及其品种鉴定方法有效
| 申请号： | 201810504433.9 | 申请日： | 2018-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN108384885B | 公开（公告）日： | 2019-12-17 |
| 发明（设计）人： | 钟永达;胥猛;郦芝汀;余发新;徐立安 | 申请（专利权）人： | 江西省科学院生物资源研究所;南京林业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 32274 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 330000 *** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 香樟 分子鉴定 品种鉴定 聚丙烯酰胺凝胶 快速分子检测 植物新品种 电泳 扩增反应 引物组合 指纹图谱 一次PCR 构建 应用 成功 | ||
1.一种香樟品种分子鉴定引物组合物，其特征在于，由4对引物组成，其引物序列如下表所示：
。
2.一种应用权利要求1所述的引物组合物快速鉴定香樟品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）提取待测样品DNA；
2）使用相同的反应体系和反应程序，按权利要求1表格中的引物顺序依次对待测香樟样本进行PCR扩增；
3）PCR产物则利用8%聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法进行检测，依据扩增产物的有无和大小进行判读，对照品种指纹代码，鉴定待测样品的品种。
3.根据权利要求2所述的应用引物组合物快速鉴定香樟品种的方法，其特征在于，步骤1）中，利用Ezup柱式植物基因组DNA抽提试剂盒完成待测样品DNA提取。
4.根据权利要求2所述的应用引物组合物快速鉴定香樟品种的方法，其特征在于，步骤2）中，10µL PCR扩增反应体系包括：1µ 10×Buffer；0.75mM MgCl2；0.025mM dNTPs；1U TaqDNA聚合酶；0.4μM SSR引物和30ng DNA模板。
5.根据权利要求2所述的应用引物组合物快速鉴定香樟品种的方法，其特征在于，步骤2）中，PCR反应程序为：预变性94℃5min；30循环的94℃30s，最佳Tm 58℃30s，72℃30s；延伸72℃3min，最终4℃保存。
6.根据权利要求2所述的应用引物组合物快速鉴定香樟品种的方法，其特征在于，步骤3）中，依据待测样品PCR产物判读情况，对照品种指纹代码，鉴定待测样品。
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