[发明专利]检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组、试剂盒及应用

说明书

本发明涉及生物技术技术领域，特别涉及一种检测塞尼卡谷病毒的RT‑LAMP引物组、试剂盒及应用。所述的检测塞尼卡谷病毒的RT‑LAMP引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示，本发明还提供了一种包含上述引物组的试剂盒，该试剂盒采用反转录环介导等温扩增技术，依赖于能够识别靶序列上6个特异区域的引物和一种具解旋功能且使靶序列呈环介导等温扩增的BstDNA聚合酶，在等温条件下可高效、快速、特异地扩增靶序列。本发明适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测，易于大范围推广应用。

技术领域

本发明涉及生物技术技术领域，特别涉及一种检测塞尼卡谷病毒的RT-LA MP引物组、试剂盒及应用。

背景技术

猪塞尼卡谷病毒(Seneca Valley vires，SVV)是一种新出现的可感染仔猪及母猪并导致仔猪死亡的病毒。病毒粒子为直径约27nm的二十面体无囊膜的单股、正链、不分节段的RNA病毒，为小RNA病毒科(Picornaviridae)塞尼卡病毒属(Seneeavirus)的唯一成员。病毒基因组含有7280个核苷酸。

猪塞尼卡谷病毒病的临诊症状具体表现为病畜鼻吻部、蹄部冠状带出现明显水泡，同时伴有跋行、厌食、嗜睡和发烧等症状。该病传染性强，发病率高，1～3日龄新生仔猪病死率可达30～70％。到目前为止，该病对养猪产业造成巨大的经济损失。

自2015年下半年后，猪塞尼卡谷病毒病在巴西、美国、加拿大、中国、哥伦比亚等多国相继发生了SVV感染猪的疫情，而且呈蔓延之势。针对该病的不断扩散，急需提出和制定有效的诊断与防控策略及措施。而目前，我国关于猪塞尼卡谷病毒研究进展的报道仍然很少，当前的检测方法主要是分子生物学检测方法和血清学检测方法。针对目前该病的不断扩散，急需提出和制定快速的诊断方法与有效的防控策略。

发明内容

为了克服现有技术中检测塞尼卡谷病毒困难、耗时长和仪器昂贵等缺点和不足，本发明的首要目的在于提供一种检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组，该引物组能快速、方便、高效地检测鉴定塞尼卡谷病毒，特异性好，灵敏度高。

本发明的另一目的在于提供一种检测塞尼卡谷病毒的试剂盒，该试剂盒包括上述引物组，该试剂盒可简便、快捷准确地检测塞内加谷病毒。

本发明的再一目的在于提供上述检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组和试剂盒的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组，包含正向内引物SVV-FIP、反向内引物SVV-BIP、正向外引物SVV-F3、反向外引物SVV-B3、正向环引物SVV-LF和反向环引物SVV-LB，其核苷酸序列如下所示：

SVV-FIP：5′-CTGTGTTCAGCAGGCTGGTCG-CGTCGCATCAAGATTACCGG-3′；

SVV-BIP：5′-GGACTGCTCTGGCATTGACCT-CAACCAGAAGGTCGTCACC-3′；

SVV-F3：5′-AGATCCCTGGCTGTCTCG-3′；

SVV-B3：5′-GCCACCTCATTGAAGTCCA-3′；

SVV-LF：5′-GGCACAACCAGAGGGGA-3′；

SVV-LB：5′-TGACATGGTTGATATCATCGCC-3′；

所述的检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组在检测塞尼卡谷病毒领域中的应用；

所述的检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组在检测塞尼卡谷病毒领域中的应用，不包含疾病的诊断目的；

一种检测塞尼卡谷病毒的试剂盒，包含上述检测塞尼卡谷病毒的RT-LAMP引物组；