[发明专利]间皮素免疫组化检测试剂盒

说明书

本申请涉及一种间皮素(Mesothelin，MSLN)免疫组化检测试剂盒，其含有MSLN单克隆抗体3‑2G6。

技术领域

本发明涉及一种检测间皮素(Mesothelin，MSLN)的免疫组化试剂盒。

背景技术

间皮素(Mesothelin，MSLN)是一种细胞表面糖蛋白。间皮素基因编码的是一个71KD的前蛋白，经修饰切割变成两段，分别是41KD的糖基化磷脂酰肌醇细胞膜锚定蛋白和30KD的被称为巨核细胞促进因子的游离片段。有研究证实41KD的膜锚定蛋白包含一段与另一个肿瘤标志物CA125蛋白的结合区，其可能与细胞粘附相关，因而该锚定蛋白可能有助于肿瘤的转移，并导致预后效果不理想。最新研究表明：MSLN在几乎全部的间皮瘤和胰腺癌，多数的卵巢癌和肺癌中高度表达，在正常组织中很少表达，一般只在胸膜间皮细胞衬、腹膜和心包有一定量表达。虽然目前Mesothelin的功能尚不确切，但是无论是细胞膜结合区还是游离区都被证实可以作为间皮癌、胰腺癌、卵巢癌等多种肿瘤的标志物和治疗靶点。

免疫组化方法的主要原理是：应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及相对定量的研究方式。

免疫组化技术的主要特点是：1.特异性强：免疫学的基本原理决定了抗原与抗体之间的结合具有高度特异性；2.敏感性高：抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合，这样高敏感性的抗体抗原反应，使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作；3.定位准确：该技术通过抗原抗体反应及呈色反应，可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察，这样就可以进行形态与功能相结合的研究，对病理学研究的深入具有重要的意义。在靶向药物的研究和临床使用过程中，采用免疫组化方法对病理组织中的目标抗原进行定位和相对定量的检测，可以预测患者是否有可能从该靶向药物的治疗中受益，在靶向药物临床试验过程中可以提高试验成功率，在靶向药物临床使用过程中可以提高用药精准度。目前，已经有多款以免疫组化为原理的伴随诊断试剂盒上市，例如：VENTANA ALK IHC检测试剂盒是获得FDA批准的用于识别适合靶向药物赫赛汀治疗的患者的体外诊断IHC检测试剂盒，2014年在华获批上市，获得了广泛的关注。但是目前尚缺乏能够满足市场需要的快速对间皮素蛋白表达进行有效检测的免疫组化抗体试剂以及相关检测方法。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种用于经福尔马林固定石蜡包埋的人胰腺癌、卵巢癌、间皮瘤等组织中MSLN的定位和半定量检测的免疫组化抗体试剂，可以对肿瘤治疗间皮素靶向用药提供指导。

由于经福尔马林固定石蜡包埋组织中MSLN抗原结构发生改变，市售抗MSLN的抗体难以有效结合并实现检测，针对这一现象本发明提供一种杂交瘤细胞株，该细胞可产能够特异性识别变性MSLN抗原的单克隆抗体。且所述杂交瘤细胞株于2017年12月20日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称：CCTCC；地址：中国武汉市武昌珞珈山)，分类命名为杂交瘤细胞3-2G6，保藏编号为CCTCC C201811。

一方面，本发明提供一种检测MSLN的免疫组化抗体组合物，其含有抗MSLN单克隆抗体3-2G6，所述抗体由以保藏编号CCTCC C201811于2017年12月20日保藏于中国典型培养物保藏中心的杂交瘤细胞产生。

在一些实施方案中，本发明的抗体组合物通过将本发明的抗体与抗体稀释液相混合得到，其中所述抗体稀释液包含PH 7.2的磷酸(PB)缓冲液，优选地，所述磷酸缓冲液浓度为0.005-0.5M，更优选0.01-0.1M。