[发明专利]一种宫颈癌筛查检测试剂盒在审
| 申请号： | 201810512874.3 | 申请日： | 2018-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN108717120A | 公开（公告）日： | 2018-10-30 |
| 发明（设计）人： | 杨清海;周洪辉;王丹;胡滨阳 | 申请（专利权）人： | 福州迈新生物技术开发有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/574 | 分类号： | G01N33/574 |
| 代理公司： | 福州市景弘专利代理事务所(普通合伙) 35219 | 代理人： | 林祥翔;黄以琳 |
| 地址： | 350108 福建省福州市闽侯县科技*** | 国省代码： | 福建;35 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 染色液 制备 宫颈癌筛查 检测试剂 试剂盒 色原 试剂盒使用 反应基团 宫颈细胞 染色结果 人力成本 有机试剂 封片剂 共价键 混合酶 新配方 检测 染色 底物 二抗 封片 一抗 节约 观察 | ||
1.一种宫颈癌筛查检测试剂盒，所述试剂盒包括p16/Ki-67混合一抗，混合酶标二抗和染色液，其特征在于，所述染色液包括AP-Red染色液和DAB染色液，所述AP-Red染色液的制备方法，包括以下步骤：
色原制备：3.5-3.7g新品红溶解于45-55ml质量百分比为1.5％-2％的盐酸溶液中，制得第一混合溶液；向第一混合溶液中加入的2-2.2g亚硝酸钠，进行重氮化反应，反应温度控制在0-5℃，得到含有重氮化新品红的第一悬浊液，将第一悬浊液进行固液分离，得到含有重氮化新品红的AP-Red色原溶液；
底物制备：0.2-0.4g萘酚AS-BI磷酸盐溶解于40-60mlpH8.2-8.6的Tris缓冲液中，得到第二混合溶液，将第二混合溶液与0.4-0.6ml二甲基甲酰胺混合，得到AP-Red底物溶液；
染色液制备：将AP-Red色原溶液与等体积的AP-Red底物溶液进行混合，得到AP-Red染色液。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述色原制备步骤中，所述重氮化反应在冰水浴中进行。
3.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述色原制备步骤中，所述亚硝酸钠在25-35min内缓慢加入。
4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述底物制备步骤中，Tris缓冲液的质量百分比浓度为18％-25％。
5.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，还包括加入Tween-20，在所述底物制备步骤中，向第二混合溶液中加入0.14-0.16ml的Tween-20。
6.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述p16/Ki-67混合一抗包括：鼠抗p16单克隆抗体和兔抗Ki-67单克隆抗体，所述混合酶标二抗包括：连接了碱性磷酸酶的羊抗鼠二抗和连接了辣根过氧化物酶的羊抗兔二抗。
7.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述AP-Red染色液在使用前30分钟内由色原溶液与底物溶液配置。
8.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述宫颈癌筛查检测试剂盒用于宫颈细胞薄片。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于福州迈新生物技术开发有限公司，未经福州迈新生物技术开发有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810512874.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
