[发明专利]一种用于检测沙门氏菌的显色培养基及其制备方法有效
申请号: | 201810516950.8 | 申请日: | 2018-05-25 |
公开(公告)号: | CN108359707B | 公开(公告)日: | 2022-10-18 |
发明(设计)人: | 于瑞莉;陈臣;陈帅;陈鹏飞;茆伟伟;周锐 | 申请(专利权)人: | 无锡市食品安全检验检测中心;无锡市赛微生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12Q1/10;C12R1/42 |
代理公司: | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人: | 王晓东 |
地址: | 214028 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 沙门氏菌 显色 培养基 及其 制备 方法 | ||
本发明公开了一种用于检测沙门氏菌的显色培养基及其制备方法,其包括,基础培养基、添加剂,所述添加剂包括酯酶显色底物,所述酯酶显色底物包括5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑辛酯及5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑壬酯,所述5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑辛酯含量为0.1~0.4g/L、所述5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑壬酯含量为0.1~0.4g/L。本发明的显色培养基各添加剂组分相互协同作用,5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑壬酯和5‑溴‑6‑氯‑3‑吲哚‑辛酯共同作为显色底物,协同促进更多酯酶反应的产生,释放出更多显色基团。本发明的显色培养基用于检测沙门氏菌具有灵敏度高,特异性强,辨识度更高、检测周期更短、适应性更强,易于产业化生产等优点。
技术领域
本发明属于微生物检测技术领域,具体涉及一种用于检测沙门氏菌的显色培养基及其制备方法。
背景技术
沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的食源性致病菌,肠杆菌科,革兰氏阴性菌。感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品,可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。我国内陆地区也以沙门氏菌为首位。
目前国内沙门氏菌检测中最常用的依然是传统国标方法。国标方法常用的鉴定培养基中以显色培养基选择性好等优点使用效果最佳。沙门氏菌显色培养基是利用沙门氏菌自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的新型培养基。这些相应的显色底物是由产色基因和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶作用下,游离出产色基因显示一定颜色,直接观察菌落颜色即可对菌种作出鉴定。
目前国内某厂家沙门显色培养基常用的底物为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷和5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯,其中β-半乳糖苷目的是区分含β-半乳糖苷酶的肠杆菌属(如弗氏柠檬酸菌杆菌),氨基己糖苷酶显色底物目的是区分念珠菌;辛酯酶显色底物目的是区分沙门氏菌。但是由于部分沙门氏菌(如伤寒沙门氏菌和甲伤寒沙门氏菌等)的酯酶活力较弱,其培养时间到达后,呈色较淡,不易观察。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊,而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述的技术缺陷,提出了本发明。
因此,作为本发明的其中一个方面,本发明克服现有技术中存在的不足,提供一种用于检测沙门氏菌的显色培养基。
为解决上述技术问题,本发明提供了如下技术方案:一种用于检测沙门氏菌的显色培养基,其包括,基础培养基、添加剂,所述添加剂包括酯酶显色底物,所述酯酶显色底物包括5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯及5-溴-6-氯-3-吲哚-壬酯,所述5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯含量为0.1~0.4g/L、所述5-溴-6-氯-3-吲哚-壬酯含量为0.1~0.4g/L。
作为本发明所述用于检测沙门氏菌的显色培养基的一种优选方案:所述基础培养基包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、细菌琼脂粉,其中,所述蛋白胨含量为8~15g/L、所述牛肉膏含量为1~5g/L、所述氯化钠含量为5~6g/L、所述细菌琼脂粉含量为15~18g/L。
作为本发明所述用于检测沙门氏菌的显色培养基的一种优选方案:所述添加剂还包括抑制剂、半乳糖苷酶显色底物、酶诱导剂、助溶剂,其中,所述抑制剂包括脱氧胆酸钠、新生霉素、头孢磺啶钠盐水合物,所述脱氧胆酸钠含量为0.4~0.6g/L、所述新生霉素含量为10~15mg/L、所述头孢磺啶钠盐水合物含量为5~10mg/L。
作为本发明所述用于检测沙门氏菌的显色培养基的一种优选方案:所述半乳糖苷酶显色底物包括5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷,所述5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷含量为0.04~0.1g/L。
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