[发明专利]一种用于水产食品中微塑料的检测方法

权利要求书

1.一种用于水产食品中微塑料的检测方法，其特征在于，所述检测方法用于淡水水产品检测，所述检测方法是将捕捞的水产品放入含荧光材料的培养液中培养后，解剖，对得到的内脏、表皮进行酶解，得到的躯干进行消解，随后再分别用荧光材料进行荧光标记，检测、计数、计算，所述荧光材料包括以下重量份数的原料：荧光粉20-25份、甲基纤维素4-6份、苯甲酸3-4份、聚丙烯酰胺1-2份、魔芋葡甘聚糖8-12份，所述荧光粉的粒径为0.3-0.5mm；

所述检测方法包括以下步骤：

样品收集：采用清洗干净的非塑料制品捕捞和装载淡水水产品样品；

样品荧光标记：将样品加入含有荧光材料的培养液中培养2-3天后，用纯水清洗样品表面，得到清洗液，收集培养液和清洗液作为待测样品1；

样品处理：将清洗后的样品进行解剖，分离出内脏、表皮和躯干；将内脏、表皮于50-60℃干燥4-5h后粉碎至3-4mm，称重，制备成为悬浮液，调节悬浮液的pH＝6-8，加入复合酶，于25-40℃保温3-7天，作为待测样品2；将躯干于60-80℃下真空干燥6-10h后粉碎至2-3mm，称重，再浸入H₂O₂和H₂CO₃混酸溶液中加热至70-80℃，调节混酸溶液的pH＝7，再加入65wt％NaOH溶液，于50-60℃下浸泡3-5h后，调节pH＝7，再次加热煮沸30min，作为待测样品3；

微塑料聚集：分别向待测样品1、待测样品2、待测样品3中加入荧光材料，机械搅拌15分钟后，再于频率20-25kHz下超声波分散30-60min后，再分别进行梯度离心，去掉上清液，取浑浊液,分别得到浑浊液1、浑浊液2、浑浊液3；

浑浊液分析计数：通过荧光检测、傅里叶变换-红外光谱显微镜对浑浊液1、浑浊液2、浑浊液3进行分析计数，计数后分别进行部位含量计算和总含量计算。

2.根据权利要求1所述的一种用于水产食品中微塑料的检测方法，其特征在于，所述荧光材料的制备步骤如下：

将荧光粉和甲基纤维素混合后溶于纯水中，并水浴加热至50-60℃，搅拌10-15min后，加入苯甲酸混合均匀，继续水浴加热至70-90℃，于300r/min的搅拌速度下加入聚丙烯酰胺，调节溶液pH＝8-9，加入魔芋葡甘聚糖，以2500-3500r/min搅拌30-45min后，干燥研磨成粉末，筛选粒径为0.4-0.7mm的粉末，得到荧光材料。

3.根据权利要求1所述的一种用于水产食品中微塑料的检测方法，其特征在于，所述样品收集步骤中非塑料制品选自不锈钢或玻璃制作的捕捞网、捕捞笼、捕捞勺，使用前用纯水清洗多次后干燥使用。

4.根据权利要求1所述的一种用于水产食品中微塑料的检测方法，其特征在于，所述样品荧光标记步骤中，将荧光材料与纯水按照体积比为1:1000混合制备成为培养液，样品培养期间不进行喂食。

5.根据权利要求1所述的一种用于水产食品中微塑料的检测方法，其特征在于，所述样品处理步骤中复合酶由0.1u/mg蛋白酶、0.5u/mg纤维素酶、0.15u/mg果胶酶、0.3u/mg脂肪酶组成。

6.根据权利要求1所述的一种用于水产食品中微塑料的检测方法，其特征在于，所述样品处理步骤中的混酸溶液为60wt％H₂O₂溶液和75wt％H₂CO₃溶液按体积比1:1.5混合制得。