[发明专利]中药复方的质量控制和评价方法

权利要求书

1.一种中药复方的质量控制和评价方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)混合对照品的制备

精密称量红景天苷、特女贞苷、女贞苷、蟛蜞菊内酯、齐墩果酸和熊果酸对照品，溶于体积浓度80％甲醇中，得到0.234mg·mL^-1红景天苷，1.502mg·mL^-1特女贞苷，0.113mg·mL^-1女贞苷，0.079mg·mL^-1蟛蜞菊内酯，0.57mg·mL^-1齐墩果酸和0.168mg·mL^-1熊果酸的混合对照品储备液，在4℃下避光保存；

(2)供试品溶液的制备

取酒女贞子粗粉加10倍量95％乙醇回流提取两次，每次2h，过滤，合并滤液；滤渣加10倍量水回流提取两次，每次2h，合并滤液；合并乙醇提取的滤液和水提取的滤液，浓缩后冷冻干燥，得酒女贞子复合提取物；

取墨旱莲药材加10倍量水煎煮2次，每次1h，过滤，合并滤液，浓缩，冷冻干燥得墨旱莲水提物；

将酒女贞子复合提取物与墨旱莲水提物按照生药比1:1配伍制备得到二至丸中药复方提取物，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，密塞，称定重量，超声提取，取出放冷，甲醇补足减失重量，摇匀，离心，取上清液即得；

(3)标准曲线的制备

取步骤(1)制备得到的混合对照品储备液，用甲醇依次稀释成5个梯度浓度，注入高效液相色谱仪进行检测，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线；

(4)供试品中有效成分的含量测定

取步骤(2)制备得到的供试品溶液，注入高效液相色谱仪进行检测，并根据步骤(3)的标准曲线进行定量分析有效成分的含量；

步骤(3)和步骤(4)高效液相色谱仪检测的色谱条件为：

Waters 2695系列高效液相色谱系统，2996PDA检测器，色谱柱为WelchXB-C₃₀，250mm×4.6mm,5μm，柱温30℃；流动相：A相为乙腈，B相为0.1％磷酸水；梯度洗脱，流速：1.0mL·min^-1；检测波长：215nm；进样体积：10μL；

梯度洗脱程序为：0～5min，5％A→9％A；5～12min，9％A→14％A；12～15min，14％A→23％A；15～26min，23％A；26～27min，23％A→35％A；27～35min，35％A→40％A；35～36min，40％A→91％A；36～48min，91％A；48～50min，91％A→95％A；50～52min，95％A；52～55min，95％A→5％A；

(5)层次分析法，层次分析法包括以下步骤：选择六个具有抗氧化活性成分红景天苷、特女贞苷、女贞苷、蟛蜞菊内酯、齐墩果酸和熊果酸作为综合评价二至丸的指标；然后依据各成分对DPPH自由基清除能力的大小，按照九点数值表两两比较，确定相对比率，由相对比率构成比较矩阵；

并使用下面的公式计算一致性比率CR和一致性指数CI，如果CR低于或等于0.10，则认为可接受，如果CR高于0.10，相对比率将被重新判断；

其中a，i，j，m分别表示判断矩阵的元素，行，列和阶数；w_i’，w_i表示为各指标的初始权重和标准化权重；λ_max为判断矩阵的最大特征值，随机指数RI是比较矩阵的平均随机一致性；

综合评价的最终目的是将所有指标值综合成一个完整性评价得分，对不同的二至丸样本进行排序，将每个指标的原始数据进行标准化，以排除不同单位和数量级差异的影响，采用下面的公式Min-max归一化计算标准化原始数据：

M_j为同指标下各组浓度的最大值，m_j为同指标下各组浓度的最小值，x_ij为标准化后的数据；

最后，选择线性加权法作为确定最终得分的方法；

xi表示相应的标准化后的含量，0≤xi≤1，其中i＝1,2,…,m；wi为相应的标准权重，其中y为综合得分，综合得分越高，表明中药复方二至丸的品质越好。