[发明专利]一种利用内置式超声制备脂肪来源细胞外基质的方法在审
| 申请号： | 201810524215.1 | 申请日： | 2018-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN108744043A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 聂云飞;张玲华 | 申请（专利权）人： | 聂云飞 |
| 主分类号： | A61L27/36 | 分类号： | A61L27/36;A61K35/35;A61L27/60;A61P17/02 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 单香杰 |
| 地址： | 510060 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 成熟脂肪细胞 超声波破碎 细胞外基质 超声制备 细胞因子 脂肪来源 外源性化学物质 移植 生物填充材料 外源性物质 离心收集 再生医学 脂肪移植 脂肪组织 自体移植 自体脂肪 存活率 脂肪源 富含 可用 并发症 去除 脂肪 疗法 应用 | ||
1.一种利用内置式超声制备脂肪来源细胞外基质的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.将脂肪组织于1000～10000rpm条件下离心1～5min，离心后若分为三层，分别为顶层油脂、中间层混合物和底层肿胀液，则弃去底层肿胀液，过滤去除顶层油脂并取滤液；若不分层或分层不明显，则重复此步骤；
S2.将S1所得滤液超声破碎，超声破碎条件为30～200W、1～100s；再继续超声破碎，超声破碎条件为10～100W、1～60s；温度25～38℃；
S3.将经S2超声破碎后的脂肪混合物于1000～10000rpm条件下离心3～10min；
S4.经S3离心后，若脂肪混合物分为三层，分别为顶层油脂、中间层混合物和底层肿胀液，且油脂层体积占脂肪混合物总体积60%以上，则弃去顶层油脂，取中间层混合物，加等体积生理盐水混匀，于4000～10000rpm条件下离心3～8min；弃去离心沉淀，收集上层浅黄色絮状物，即得富含细胞因子的细胞外基质材料；若脂肪混合物不分层或分层不明显，则重复S2～S3。
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，S2中所述超声破碎的条件为30～150W、10～80s，再继续超声破碎，超声破碎条件为10～80W、1～50s、26～37℃。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，S2中所述超声破碎的条件为30～100W、10～60s，再继续超声破碎，超声破碎条件为10～60W、1～40s、27～37℃。
4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于，S2中所述超声破碎的条件为30～80W、10～50s，再继续超声破碎，超声破碎条件为10～50W、1～35s、28～36℃。
5.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，S1中所述过滤为20～120目数筛网过滤。
6.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，所述筛网的目数为60～80目。
7.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，所述筛网过滤时采用负压吸取残留在过滤器中的脂肪组织。
8.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，S1中所述离心条件为4000～5000rpm离心2～5min。
9.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，S3中所述离心条件为3000～5000rpm离心3～5min。
10.由权利要求1～9任一项所述制备方法制得的脂肪来源细胞外基质在制备皮肤移植材料、软组织填充材料、修复药物或皮肤抗皱产品中的应用。
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