[发明专利]一种用于检测脑母细胞瘤易感性相关的SNP位点的引物及检测方法在审
申请号: | 201810527467.X | 申请日: | 2018-05-29 |
公开(公告)号: | CN108441563A | 公开(公告)日: | 2018-08-24 |
发明(设计)人: | 刘小银;张蓉;刘宇;魏莎 | 申请(专利权)人: | 成都中创清科医学检验所有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12N15/11 |
代理公司: | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人: | 李林合 |
地址: | 610041 四川省成都市中国(四川)自*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 引物 母细胞瘤 位点 易感性 检测 胶回收 荧光标记PCR 引物特异性 纯化产物 目的基因 引物检测 提取DNA 多态性 可预测 灵敏度 测序 上机 采集 分析 | ||
本发明提供了一种用于检测脑母细胞瘤易感性相关的SNP位点的引物及检测方法,该引物包括位于rs62315594位点的引物、位于rs3761121位点的引物、位于rs62335293位点的引物以及位于rs5019252位点的引物。采用该引物检测脑母细胞瘤易感性相关的SNP位点多态性的方法,包括以下步骤:(1)采集样品并提取DNA;(2)采用上述引物分别进行目的基因的PCR扩增、胶回收;(3)测定胶回收产物的浓度,进行荧光标记PCR反应,并对反应产物进行纯化;(4)将纯化产物上机测序,并对SNP检测结果进行分析。该引物特异性好、灵敏度高、准确性好,检测方法简单,可预测受检者患脑母细胞瘤的风险。
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种用于检测脑母细胞瘤易感性相关的SNP位点的引物及检测方法。
背景技术
人脑母细胞瘤是一种起源于星形胶质细胞的侵袭能力极强、血管分化良好的肿瘤,是原发性恶性脑肿瘤中最常见、死亡率最高的肿瘤,占人类原发恶性脑肿瘤的70%。目前的治疗手段包括手术切除及术后辅助放化疗,然而疾病的预后效果仍然不理想,因此,人脑母细胞瘤的早预测、早预防便显得极其重要。
医学研究表明,所有的疾病或多或少都和基因有一些关联,遗传基因的差异是疾病发生发展中内因的物质基础。单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphsm,SNP)是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性,它是人类可遗传的基因组变异中最常见的一种,占所有已知多态性的90%以上。SNP在人类基因组中广泛存在,平均每500-1000个碱基对中就有1个,估计其总数可达300万个甚至更多。
通过检测与脑母细胞瘤易感性相关的SNP,就能够帮助脑母细胞瘤易感人群了解其患脑母细胞瘤的风险,提前做好预防工作,避免脑母细胞瘤的发生,脑母细胞瘤越早发现并及时诊治,治愈机会就越大。
通过检测与脑母细胞瘤易感性相关的SNP位点的多态性,不仅可以从分子遗传学水平上了解细胞癌变机制,而且对脑母细胞瘤的预测、预防、遗传咨询等具有重要意义。
发明内容
针对现有技术中存在的上述问题,本发明提供一种用于检测脑母细胞瘤易感性相关的SNP位点的引物及检测方法,其引物特异性好,检测方法准确性高,可用于脑母细胞瘤的风险评估,为脑母细胞瘤的疾病预防提供指导。
为实现上述目的,本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
一种用于检测脑母细胞瘤易感性相关的SNP位点的引物,这些引物包括位于RTEL1基因rs62315594位点的引物、位于ZGPAT基因rs3761121位点的引物、位于ARFRP1基因rs62335293位点的引物以及位于ZBTB46基因rs5019252位点的引物;
其中,rs62315594位点的引物为F:5′-TGTGTATTCTCCAAACTGC-3′(SEQ ID No:1)和R:5′-AGGAAGTAGACACGCTGA-3′(SEQ ID No:2);
rs3761121位点的引物为F:5′-AGGTGGACGTCTGTAAGA-3′(SEQ ID No:3)和R:5′-ATGTCTCTATTTCCCTAAGC-3′(SEQ ID No:4);
rs62335293位点的引物为F:5′-CACCCATCACACCTACC-3′(SEQ ID No:5)和R:5′-GTATGTGCTGCTCTAGTGG-3′(SEQ ID No:6);
rs5019252位点的引物为F:5′-CAACTCACTTCATGTCTGG-3′(SEQ ID No:7)和R:5′-AAGAAGTATGTGTGCAAGGT-3′(SEQ ID No:8)。
采用上述引物检测脑母细胞瘤易感性相关的SNP位点多态性的方法,包括以下步骤:
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