[发明专利]一种2;4;4′-三溴联苯醚半抗原的制备方法及其用途

说明书

本发明公开了一种2,4,4′‑三溴联苯醚半抗原的制备方法及其用途，以2,4‑二溴苯酚与对氟硝基苯为原料，进行亲电取代反应合成4‑硝基‑2′,4′‑二溴联苯醚，然后通过加氢还原反应制备2,4,4′‑三溴联苯醚半抗原，克服2,4,4′‑三溴联苯醚不具备与载体蛋白偶联的活性基团问题，方法简单、速度快、产率较高，合成的2,4,4′‑三溴联苯醚半抗原可用于2,4,4′‑三溴联苯醚人工包被原的制备及2,4,4′‑三溴联苯醚免疫分析方法的建立。

技术领域

本发明属于生物化学领域，涉及一种三溴联苯醚半抗原的制备方法及其用途，具体涉及2,4,4′-三溴联苯醚半抗原的制备方法及其用途。

背景技术

多溴联苯醚(PBDEs)属于溴系阻燃剂的一种，因其阻燃效率高，热稳定性好，添加量少，对材料性能影响小，价格便宜而被作为阻燃剂大量生产并应用于聚合物中，尤其在电器制造(电视机、计算机线路板和外壳等)、建筑材料、室内装潢家具、汽车内层、装饰织物、泡沫、纤维等。2,4,4′-三溴联苯醚(BDE-28)是多溴联苯醚同系物中的一种，广泛存在于大气、水体及土壤等环境介质中，同时BDE-28在食品领域中也常有检出如农作物和海洋鱼类产品等，BDE-28是检出率较高的多溴联苯醚同系物之一，对人体具有严重危害，其亲脂性强，化学性质较为稳定，可以通过食物链的传递到达人体内，并可能在体内富集到很高的浓度，具有生物蓄积性和高致毒性，是一种典型的持久性有机污染物。

虽然商业多溴联苯醚中没有三溴联苯醚同系物，但在环境及富含多溴联苯醚的设备中，高溴联苯醚在高温及紫外线照射的情况下易于分解转化为三溴联苯醚，导致BDE-28在环境介质中分布广泛且含量较高。目前，有很多关于环境及食品领域中BDE-28及其他多溴联苯醚同系物检测方法的报道，如气相色谱-质谱联用技术、高效液相色谱法等仪器分析方法，但其检测速度及灵敏度均有待于进一步提高。气相色谱法是目前最常用的多溴联苯醚同系物的检测方法，也是大多数国家检测PBDEs所采用的标准方法，但其耗时长且成本高，同时色谱分析方法对操作人员的专业性要求很高，不适合推广应用，也不利于环境事故现场的快速检测。

近年来，利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定多溴联苯醚的研究成为其快速监测方法的研究方向。ELISA方法是基于抗原与专一抗体的特异性识别和可逆性结合的原理来检测抗原或抗体的痕量分析检测技术，污染物人工抗原及特异性强的高效价多克隆抗体是ELISA方法建立的基础。如Feng等以BDE-121为研究对象，设计合成了BDE-121人工抗原及多克隆抗体，建立了间接竞争ELISA免疫分析方法，检测限为0.644ng/mL；Wang等通过在5-OH-BDE-47引入丁酸衍生物，再与钥孔血蓝蛋白偶联形成BDE-47人工全抗原，获得相应的人工BDE-47多克隆抗体，建立一种快速ELISA方法检测环境介质中的BDE-47，最低检测限为0.1ng/mL。但是，由于PBDEs的同系物较多，在环境样品中浓度极低，且会受到其他有机化合物干扰，需要更为精确的免疫分析方法来检测环境样品中的PBDEs，有关三溴联苯醚免疫BDE-28免疫分析方法的研究比较少见，也很少有关于制备BDE-28半抗原及人工全抗原的研究和应用报道。

发明内容

本发明的发明人在前期研究的基础上发现，以2,4-二溴苯酚与对氟硝基苯为原料，进行亲电取代反应合成4-硝基-2′,4′-二溴联苯醚，然后通过加氢还原反应制备含氨基活性基团的BDE-28半抗原4-氨基-2′,4′-二溴联苯醚(BDE-28-NH₂)，可以克服BDE-28分子不具备能够与载体蛋白偶联的活性基团的缺陷，本发明的目的在于提供一种2,4,4′-三溴联苯醚(BDE-28)半抗原的制备方法，用于制备BDE-28人工包被原，和建立2,4,4′-三溴联苯醚的相关免疫分析方法。

本发明的上述目的通过以下技术方案实现：

一种2,4,4′-三溴联苯醚半抗原，分子式为C₁₂H₉NOBr₂，结构式如式(Ⅰ)所示，