[发明专利]一种利福平负载丝素蛋白纳米微球的制备方法

权利要求书

1.一种利福平负载丝素蛋白纳米微球的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

步骤1：将已脱胶的蚕丝浸润在9.3mol/L的LiBr溶液中，60℃溶解4h，溶解后获得的丝素蛋白溶液倒入透析袋中用去离子水透析3d，透析结束后将丝素蛋白溶液以8000rpm的转速离心10min去除不溶物杂质，然后倒入透析袋中，用聚乙二醇溶液进行反透析，获得浓缩的丝素蛋白溶液，以去离子水稀释得到丝素蛋白溶液；

步骤2：取药物利福平0.003～0.005g定溶于5mL乙醇中，得到0.6～1.0mg/mL的利福平乙醇溶液，随后滴加至步骤1获得的丝素蛋白溶液中，低速搅拌2～5min，得到的混合溶液冷冻处理；

步骤3：取出冷冻后的混合溶液，室温下解冻得到药物利福平负载的丝素蛋白纳米微球悬浮液，加入乙醇溶液稀释，离心洗涤，去除上层溶液，将所得沉淀冷冻干燥，得到利福平负载丝素蛋白纳米微球粉末；

步骤1中，用去离子水透析时，透析袋截留量为14000；以聚乙二醇溶液进行反透析时，聚乙二醇溶液的浓度为10wt％，分子量为20000；

步骤1中，丝素蛋白溶液的浓度为2～5wt％；

步骤2中，丝素蛋白溶液与利福平乙醇溶液的体积比为5:1.5。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

步骤2中，冷冻处理的温度为-20℃，时间为24h。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

步骤3中，所述离心洗涤是在12000rpm下用乙醇离心洗涤，每次30min，重复2～3次。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

步骤3中，冷冻干燥的温度为-50℃，时间为24h。