[发明专利]HPV分型检测用的核酸组合物及应用

权利要求书

1.一种HPV分型检测用的核酸组合物，其特征在于，包括PCR扩增引物和检测探针；

所述PCR扩增引物包括用于扩增HPV病毒L1区的变异区域的病毒PCR扩增引物对；

所述检测探针包括14个序列或互补序列中含有分别如SEQ ID NO:1～14所示序列的病毒寡核苷酸探针。

2.如权利要求1所述的HPV分型检测用的核酸组合物，其特征在于，所述病毒PCR扩增引物对的序列分别如SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16所示。

3.如权利要求1所述的HPV分型检测用的核酸组合物，其特征在于，所述PCR扩增引物还包括对照PCR扩增引物对，所述检测探针还包括对照寡核苷酸探针；

所述对照PCR扩增引物对用于扩增人管家基因的一序列片段；

所述对照寡核苷酸探针能够与由所述对照PCR扩增引物对扩增得到的产物形成的其中一寡核苷酸链互补配对。

4.如权利要求1～3中任一项所述的HPV分型检测用的核酸组合物，其特征在于，所述检测探针的5’端还含有序列如SEQ ID NO:20所示的连接序列片段。

5.一种HPV分型检测用的检测芯片，其特征在于，包括芯板、载体以及如权利要求1～4中任一项所述的HPV分型检测用的核酸组合物中的检测探针；所述芯板具有芯槽，所述载体位于所述芯槽内，所述检测探针固定于所述载体上，且不同的检测探针固定于所述载体的不同区域。

6.如权利要求5所述的HPV分型检测用的检测芯片，其特征在于，所述检测探针与所述载体的表面经过共价结合的方式连接。

7.一种HPV分型检测用的检测芯片的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：

在检测探针的5’端以及载体的表面分别修饰形成第一连接基团和第二连接基团，所述第一连接基团能够与所述第二连接基团共价结合；

将5’端标记有所述第一连接基团的检测探针与表面修饰有所述第二连接基团的载体进行共价连接反应，使所述检测探针固定于所述载体的表面；

将固定有所述检测探针的载体固定在芯板的芯槽中。

8.一种HPV分型检测用的试剂盒，其特征在于，包括PCR扩增引物和如权利要求5或6所述的HPV分型检测用的检测芯片，所述PCR扩增引物的下游引物的5’端连接有连接物。

9.如权利要求8所述的HPV分型检测用的试剂盒，其特征在于，还包括核酸提取试剂、PCR扩增试剂、杂交试剂、杂交洗涤试剂、酶杂交试剂、酶洗涤试剂以及显色试剂中的至少一种。

10.一种如权利要求8或9所述的HPV分型检测用的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：

配制PCR反应液，并进行PCR扩增反应；

将PCR扩增反应的产物与所述检测芯片上的检测探针进行杂交反应；

对杂交反应后的产物进行显色反应。