[发明专利]检测多粘菌素耐药基因的多重PCR引物、试剂盒及检测方法在审
申请号: | 201810531961.3 | 申请日: | 2018-05-29 |
公开(公告)号: | CN108384851A | 公开(公告)日: | 2018-08-10 |
发明(设计)人: | 冯友军 | 申请(专利权)人: | 青岛智烨生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人: | 袁晓玲 |
地址: | 266000 山东省青岛市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 引物 耐药基因 多粘菌素 检测 多重PCR引物 种检测 多重PCR反应 基因家族 基因序列 检测试剂 引物设计 灵敏度 试剂盒 优化 | ||
1.一种检测多粘菌素耐药基因的多重PCR引物,其特征在于,由以下五个引物对组成:SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的引物对、SEQ ID No:3和SEQ ID No:4所示的引物对、SEQID No:5和SEQ ID No:6所示的引物对、SEQ ID No:7和SEQ ID No:8所示的引物对以及SEQID No:9和SEQ ID No:10所示的引物对。
2.一种检测多粘菌素耐药基因的检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒中包含权利要求1所述的五个引物对。
3.一种检测多粘菌素耐药基因的多重PCR检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)配置多重PCR反应体系:1μL待测菌液或50ng左右的质粒DNA为模板,权利要求1所述的五个引物对,每条引物均为3μmol/L,80%甘油1.5μL,2×Taq MasterMix 12.5μL,最后加水补足体积为25μL;
(2)进行PCR扩增,多重PCR反应程序:预变性94℃2min;变性94℃30s,退火56℃30s,延伸72℃1min共25个循环;终延伸72℃2min;
(3)对多重PCR产物进行凝胶电泳检测。
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