[发明专利]一种番茄果实转录因子CNR多克隆抗体及其制备方法有效
申请号: | 201810533073.5 | 申请日: | 2018-05-29 |
公开(公告)号: | CN108409858B | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 李玲;白娟娟;闫师杰;梁丽雅;刘铁玲 | 申请(专利权)人: | 天津农学院 |
主分类号: | C07K16/16 | 分类号: | C07K16/16;C07K16/06;C07K14/415;C12N15/29;C12N15/70;G01N33/68 |
代理公司: | 天津创智天诚知识产权代理事务所(普通合伙) 12214 | 代理人: | 陈昌娟;田阳 |
地址: | 300384 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 番茄 果实 转录 因子 cnr 克隆 抗体 及其 制备 方法 | ||
1.一种番茄果实转录因子CNR多克隆抗体的制备方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)构建含有SEQ ID No:1所示核苷酸序列的重组表达载体,将所述重组表达载体转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,转入pET-30a原核表达载体中;
(2)经过大量表达和纯化,获得CNR蛋白抗原;
(3)将所述CNR蛋白抗原免疫动物,经血清分离纯化获得番茄CNR蛋白的多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述重组表达载体是将含有SEQ IDNo.1所示的核苷酸序列的片段克隆至原核表达载体获得的。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述CNR蛋白抗原含有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。
4.根据权利要求1、2、3中任意一项所述的制备方法,其特征在于,免疫动物的步骤包括3次免疫,首先将纯化的CNR蛋白抗原与完全弗氏佐剂混合后第1次免疫动物,而后将纯化的CNR蛋白抗原与非完全弗氏佐剂混合后进行第2-3次免疫,每次免疫的时间间隔为14天。
5.利用权利要求1-4中任意一项所述的方法制备的番茄CNR蛋白多克隆抗体。
6.权利要求5所述的番茄CNR蛋白多克隆抗体在制备检测番茄CNR蛋白试剂盒中的应用。
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