[发明专利]一种抗肿瘤耐药的介孔二氧化钛纳米药物组合物及其制备方法

权利要求书

1.一种抗肿瘤耐药的介孔二氧化钛纳米药物组合物的制备方法，其特征在于，所述的介孔二氧化钛纳米药物组合物以氨基化的介孔二氧化钛为载体，环五肽-透明质酸ADH-1-HA为靶向材料，阿霉素为模型药物；所述的靶向材料中的环五肽ADH-1作为发生上皮间质转化的肿瘤细胞中N-cadherin的靶向抑制剂；靶向材料中的透明质酸HA主动靶向递送的靶头分子，可以与高表达CD44受体的肿瘤细胞进行特异性识别，同时HA还作为ADH-1与氨基化的介孔二氧化钛之间的交联剂；

所述抗肿瘤耐药的介孔二氧化钛纳米药物组合物的制备方法，包括以下步骤：

第一步，合成抗肿瘤耐药的靶向材料环五肽-透明质酸ADH-1-HA

1.1)将透明质酸钠溶于去离子水并置于茄型瓶中，室温下水化过夜，得到透明质酸钠水溶液；步骤1.1)中所述的透明质酸钠水溶液的浓度为5-10mg/ml，透明质酸钠的分子量为37KDa；

1.2)室温下，将1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐EDC和N-羟基琥珀酰亚胺NHS依次加入步骤1.1)得到的透明质酸钠水溶液中，反应2-4h，活化透明质酸纳上的羧基得到混合溶液；所述的步骤1.2)中EDC与NHS的摩尔比为1:1-0.5，透明质酸纳上的羧基与EDC的摩尔比为1:1-1.5；

1.3)室温下，将环五肽ADH-1加入步骤1.2)得到的混合溶液中，搅拌使其完全反应；反应结束后将反应液转移至透析袋中，并采用去离子水透析纯化后，将透析袋中的溶液冷冻干燥，得到产物ADH-1-HA；所述的透明质酸钠与环五肽ADH-1的摩尔比为3:1-5:1；

第二步，合成氨基化修饰的介孔二氧化钛纳米粒子

2.1)室温下，将无水乙醇与正庚酸加入烧杯中搅拌充分混匀后，再加入钛源钛酸四丁酯继续搅拌15-20min，此时溶液呈现无色透明，最后再加入去离子水继续搅拌20-30min，溶液由无色透明变为白色乳状液；

所述的每5-30ml的无水乙醇对应加入50-100μl正庚酸、300-400μl钛源钛酸四丁酯后，最后再对应加入5-10ml的去离子水；

2.2)室温下，将反应后的溶液置于反应釜中，110-130℃水热40-50min后，将反应液用无水乙醇和去离子水清洗后烘干得到介孔二氧化钛纳米粒MTN；

2.3)室温下，将MTN加入无水乙醇中搅拌均匀后，再加入三氨丙基三甲氧基硅烷APTMS，避光搅拌24-36h使其充分反应，得到反应液；将反应液用无水乙醇和去离子水清洗后冷冻干燥得到氨基化的介孔二氧化钛；

所述的每20-40ml的无水乙醇对应加入5-10mg的MTN、100-200μl的三氨丙基三甲氧基硅烷APTMS；

第三步，合成抗肿瘤耐药的介孔二氧化钛纳米药物组合物

3.1)将第一步得到的抗肿瘤耐药的靶向材料ADH-1-HA溶于去离子水并置于茄型瓶中，室温下过夜水化；所述的靶向材料ADH-1-HA的浓度为8-10mg/ml；

3.2)将EDC与NHS分别加到步骤2.1)得到的溶液中，活化2-4h；将氨基修饰的介孔二氧化钛纳米粒子加到上述溶液中，室温条件下搅拌24-36h得到反应液；

3.3)将3.2)得到的反应液经过去离子水洗涤纯化后，冷冻干燥即得抗肿瘤耐药的介孔二氧化钛纳米药物组合物。

2.根据权利要求1所述的一种抗肿瘤耐药的介孔二氧化钛纳米药物组合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤1.3)中搅拌时间不低于48h。

3.根据权利要求1所述的一种抗肿瘤耐药的介孔二氧化钛纳米药物组合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤1.3)中透析袋的截留分子量为3500-37500。

4.根据权利要求2所述的一种抗肿瘤耐药的介孔二氧化钛纳米药物组合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤1.3)中透析袋的截留分子量为3500-37500。

5.根据权利要求1所述的一种抗肿瘤耐药的介孔二氧化钛纳米药物组合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤1.3)中去离子水透析纯化的时间为24-48h。