[发明专利]一种检测HPS、SS2、Pm、APP的复合PCR试剂盒

权利要求书

1.一种检测HPS、SS2、Pm、 APP的复合PCR试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括：a) PCR反应液、b)10×PCR buffer、c)Taq酶、d)dNTP、e)ddH₂O、f)阳性质控品和阴性质控品；

其中，所述PCR反应液包括：序列为 SEQ ID NO.1 、SEQ ID NO.2的检测副猪嗜血杆菌的上游、下游引物；

序列为 SEQ ID NO.3 、SEQ ID NO.4的检测猪链球菌2型的上游、下游引物；

序列为 SEQ ID NO.5 、SEQ ID NO.6的检测猪产毒多杀性巴氏杆菌的上游、下游引物；

序列为 SEQ ID NO.7 、SEQ ID NO.8的检测猪胸膜肺炎放线杆菌的上游、下游引物；

所述阳性质控品为HPS、SS2、Pm、APP基因组PCR产物。

2.如权利要求1所述的一种检测HPS、SS2、Pm、 APP的复合PCR试剂盒，所述试剂盒的反应体系和条件为：在 25 μL 体系中 rTaq 酶加 0.75 μL ，Mg ²⁺ 加 1.75 μL ，引物总体积为 1 μL ，dNTP 加 1.5 μL。

3.如权利要求1所述的一种检测HPS、SS2、Pm、 APP的复合PCR试剂盒，其特征在于：所述PCR反应液中的上游、下游引物浓度均为5µM。

4.如权利要求1所述的一种检测HPS、SS2、Pm、 APP的复合PCR试剂盒，所述PCR 扩增条件为：94℃ 5min、94℃ 30s、58℃ 30s 、72℃ 50s、72℃ 10min、4℃ 2h；其中，94℃ 30s、58℃ 30s、72℃ 50s各循环30次。

5.如权利要求1-4任一项所述的一种检测HPS、SS2、Pm、 APP的复合PCR试剂盒，可用于猪呼吸道病原菌的快速检测。