[发明专利]一种精氨酸菌种的纯化方法在审
申请号: | 201810539021.9 | 申请日: | 2018-05-30 |
公开(公告)号: | CN108753617A | 公开(公告)日: | 2018-11-06 |
发明(设计)人: | 陆可;谢畅丰;王海波 | 申请(专利权)人: | 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/02 | 分类号: | C12N1/02;C12R1/15 |
代理公司: | 深圳市君之泉知识产权代理有限公司 44366 | 代理人: | 张丕阳 |
地址: | 526072 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 精氨酸 恒温培养箱 培养基 纯平板 单菌落 接种环 单株 菌种 发酵技术领域 食品微生物 斜面培养基 复壮 产酸水平 出发菌株 工作效率 培养周期 甘油 单菌株 划线法 菌落 划线 发酵 配制 生长 污染 | ||
1.一种精氨酸菌种的纯化方法,步骤为:
A、配制分纯平板培养基;
B、划线分纯:以L-精氨酸甘油种为出发菌株,用接种环挑环种,放在步骤A的分纯平板培养基上用划线法进行单株分纯,并放到恒温培养箱培养,恒温培养箱的温度为32±0.5℃;
C、挑单菌株:培养至48±2h,单株菌落直径达到0.8~1.2mm,用接种环挑选单菌落于斜面培养基中,斜面种放恒温培养箱32±0.5℃培养。
所述步骤A的培养基配方为:配方为牛肉膏1.0±0.1%、酵母粉1.0±0.1%、蛋白胨0.5±0.05%、氯化钠0.5±0.05%、琼脂2.0±0.2%、葡萄糖1.0±0.1%、尿素0.25±0.02%、组氨酸0.03±0.002%,PH7.0。
2.根据权利要求1所述的精氨酸菌种的纯化方法,其特征在于:所述的步骤A是将培养基用纯化水溶解,水浴加热至融化,定容后调PH7.0,121±1℃灭菌20±2分钟,待培养基冷却至50±2℃,按无菌操作法倒入平板平置,凝固后放32±0.5℃培养箱预孵24±2小时。
3.根据权利要求2所述的精氨酸菌种的纯化方法,其特征在于:所述的按无菌操作法倒入平板平置是指按无菌操作法倒2只平板平置,所述平板培养基装量是15±1ml。
4.根据权利要求3所述的精氨酸菌种的纯化方法,其特征在于:所述的步骤B中划线法是指将平板皿作分区标记,在平板皿底划分成A、B、C、D四个面积不等的区域,各区之间的交角应为120±10℃。
5.根据权利要求4所述的精氨酸菌种的纯化方法,其特征在于:所述的步骤B划线法还包括在每个区域中划连续的平行线。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的精氨酸菌种的纯化方法,其特征在于:L-精氨酸甘油种为出发菌株为棒状杆菌。
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