[发明专利]一种免疫细胞的储存方法及细胞冻存液在审
申请号: | 201810540614.7 | 申请日: | 2018-05-30 |
公开(公告)号: | CN108513973A | 公开(公告)日: | 2018-09-11 |
发明(设计)人: | 徐智峰;张新 | 申请(专利权)人: | 广州沙艾生物科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京华识知识产权代理有限公司 11530 | 代理人: | 刘艳玲 |
地址: | 510000 广东省广州市国际*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞冻存液 免疫细胞 胎牛血清 储存 冻存 细胞基础培养基 二甲基亚砜 生理学功能 体积百分比 功能保持 细胞保存 诱导培养 指标检测 重要意义 存活率 外周血 采集 复苏 治疗 | ||
本发明涉及细胞保存技术领域,具体涉及一种免疫细胞的储存方法及细胞冻存液,包含以下步骤:首先,采集和收集外周血,其次,对外周血进行分离,再次,往其中加入细胞冻存液进行冻存;细胞冻存液按照体积百分比,包含以下组分细胞基础培养基、胎牛血清、二甲基亚砜。本发明的免疫细胞储存方法步骤简单、易于操作,且胎牛血清具有来源广泛,价格低廉的优点,有利于减少成本,便于推广使用;免疫细胞在细胞冻存液中冻存复苏后经过诱导培养的存活率在90%以上,免疫细胞的各项指标检测显示其功能保持完好,这表明细胞冻存液可以很好地保持免疫细胞的生理学功能,对于临床上的治疗具有重要意义。
技术领域
本发明涉及细胞培养技术领域,具体涉及一种免疫细胞的储存方法及细胞冻存液。
背景技术
近年来,由于环境空气污染的日益严重、社会竞争的加剧和人们的生活压力不断增大使到人们的身心长期处于紧绷状态,严重影响了人们的身体健康,并且,绝大部分工薪一族长期缺乏锻炼导致身体素质也不断下降,身体抵抗力逐渐减弱;越来越多人的身体出现亚健康问题,越来越多人的身体出现内分泌失调、抵抗力下降等各种问题;而且,由于现在食品和化妆品中添加剂的违法添加和滥用、重金属含量和农残超标的情况依然相当严重,这些都对人们的身体健康有严重的损害,并导致了现在的肿瘤、癌症等疾病的发病率大大增加,并有年轻化的趋势。
传统的肿瘤和癌症的治疗,主要以放疗、化疗、手术为主;它们治疗的靶向目标是肿瘤细胞和组织;对一些良性肿瘤的治疗取得了不错的治疗效果,但是,对于一些恶性肿瘤或者的治疗效果却不太理想;对于一些免疫力较为低下的患者,也难以承受放疗、化疗等治疗所产生的副作用,限制了上述疗法的使用范围也影响了治疗效果。
免疫治疗是近年来治疗癌症和肿瘤的新兴的重要手段,在临床上与上述三种疗法对于肿瘤的治疗方向不同,免疫治疗是指针对机体低下或亢进的免疫状态,将自体的免疫细胞经体外刺激、培养、扩增然后回输来提高患者的免疫力,依靠自身免疫机能杀灭癌细胞和肿瘤组织;而且,免疫治疗作为目前新兴的治疗方法,它能够按照患者身体差异制备治疗药物和治疗方案,与现在的传统疗法相比,具有毒副作用较少,肿瘤针对性和特异性更强等优点,被认为是治疗肿瘤的新希望,目前已在一些肿瘤的治疗上取得了不错的效果,使人们恢复了健康。
免疫治疗中所用的人体免疫细胞的的免疫能力与人体健康状态息息相关,如果能将人体健康状态较好的免疫细胞保存下来,可以更好地用于抗肿瘤治疗,有利于取得更好的治疗效果;现在对于免疫细胞的有效的保存其活性的有效保存方法和冻存液还较少,急需有效的免疫细胞保存方法和细胞冻存液以保存免疫细胞。
发明内容
本发明目的在于提供一种免疫细胞的储存方法及细胞冻存液,本免疫细胞储存方法步骤简单、易于操作;尽管,目前,对于免疫细胞的培养保存主要都以自体血浆为主,而且,目前临床还是使用自体血清培养为主,对于异种血清和同种异体血浆的相关研究还较少;但是,自体血清数量有限,来源较少;而同种异体血清和异体血清来源广泛,更方便用于细胞储存,其中尤其作为异体血清的动物血清来源更为广泛,价格更为低廉,更适合作为将来用于免疫细胞培养储存使用。
本细胞冻存液能够很好地保护免疫细胞的各项性能,避免免疫细胞在冻存的过程中受到损伤,更好的起到保存免疫细胞的作用。
为了实现上述目标,本发明通过以下技术方案予以实现:
一种免疫细胞冻存液,所述的免疫细胞冻存液按体积百分比包含以下组分:40%~75%1640培养基、20%~45%胎牛血清和8%~20%二甲基亚砜。
优选地,所述的免疫细胞冻存液按体积百分比包含以下组分:45%~65%1640培养基、25%~40%胎牛血清和10%~20%二甲基亚砜。
更优选地,所述的免疫细胞冻存液按体积百分比包含以下组分:50%~60%1640培养基、25%~35%胎牛血清和10%~15%二甲基亚砜。
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