[发明专利]适配体修饰的α-Gal脂质体及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种适配体修饰的α‑Gal脂质体及其制备方法与应用。所述适配体修饰的α‑Gal脂质体包括α‑Gal脂质体膜以及适配体，所述适配体采用胆固醇修饰的核酸适配体，所述适配体的胆固醇修饰区域嵌入α‑Gal脂质体膜，核酸适配体区域从α‑Gal脂质体膜表面露出。所述制备方法包括：将α‑Gal脂质体膜与含有胆固醇修饰的核酸适配体的缓冲液进行水合，使得胆固醇修饰的核酸适配体部分嵌入所述α‑Gal脂质体膜，形成适配体修饰的α‑Gal脂质体。本发明的适配体修饰的α‑Gal脂质体生物相容性好，对正常细胞毒性低，适配体的修饰可特异地靶向癌细胞，能够引起自身免疫系统对癌细胞的杀伤。

技术领域

本发明属于生物技术领域，更具体地，本发明涉及一种适配体修饰的α-Gal脂质体及其制备方法，以及基于该适配体修饰的α-Gal脂质体的双特异试剂，以及其应用于制备癌症治疗药物领域的应用。

背景技术

随着肿瘤分子生物学和免疫学的发展，肿瘤靶向治疗和免疫治疗成为癌症治疗的热点。肿瘤靶向治疗具较好的分子特异性、能有效地选择性地杀伤癌细胞，且副作用低。而肿瘤的免疫治疗则具是利用人体自身免疫系统杀伤癌细胞。而肿瘤靶向的免疫治疗能结合二者的优点，特异性地引起自身免疫系统高效杀伤癌细胞。

α-Gal抗原表位(galactose-α-1,3-galactosyl-β-1,4-N-acetyl-glucosamine)，是一种三糖类的抗原，天然产生于糖脂糖蛋白上，普遍存在于各种微生物、非灵长类哺乳动物、有袋动物和新世界猴中，但不存在于人类、猿和旧世界猴。不同的物种α-Gal抗原表位表达的位置也不同。在兔和雌牛的血红细胞膜的糖脂上大量表达，在鼠艾氏腹水癌细胞和淋巴瘤细胞中则大量表达在细胞膜上的糖蛋白，牛科、犬科和猪科动物则表达于甲状腺球蛋白。人体约1％的循环IgG是抗α-Gal的天然抗体。它是由于肠道菌落持续地抗原刺激B细胞产生的。不同的物种α-Gal抗原表位表达的位置也不同。

α-Gal脂质体通常是由兔血红细胞膜提取的纳米载体，主要组分为α-Gal糖脂、磷脂和胆固醇。目前α-Gal脂质体被用于肿瘤免疫治疗中，需直接注射于肿瘤部位，由于α-Gal脂质体能募集抗α-Gal的抗体于脂质体表面，抗原抗体的结合激活补体依赖的细胞毒作用(CDC)以及抗体依赖的细胞毒作用(ADCC)，诱导巨噬细胞和自然杀伤细胞裂解α-Gal脂质体附近的癌细胞。然而这种脂质体并不能区分正常细胞和癌细胞，极有可能会引起自身免疫疾病。因此发展能特异靶向癌细胞的α-Gal脂质体有望成为肿瘤靶向免疫治疗的新策略。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种适配体修饰的α-Gal脂质体及其制备方法与应用，以克服现有技术中的不足。

为实现上述发明目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明实施例提供了一种适配体修饰的α-Gal脂质体，其包括：α-Gal脂质体膜以及适配体，所述适配体采用胆固醇修饰的核酸适配体，所述适配体的胆固醇修饰区域嵌入α-Gal脂质体膜，核酸适配体区域从所述α-Gal脂质体膜表面露出。

在一些实施例中，所述核酸适配体包括AS1411。

本发明实施例还提供了一种适配体修饰的α-Gal脂质体的制备方法，其包括：

提供α-Gal脂质体膜；

将所述α-Gal脂质体膜与含有胆固醇修饰的核酸适配体的缓冲液进行水合，使得胆固醇修饰的核酸适配体部分嵌入所述α-Gal脂质体膜，形成适配体修饰的α-Gal脂质体。

在一些实施例中，所述制备方法还包括：将所述α-Gal脂质体膜与含有胆固醇修饰的核酸适配体的缓冲液进行水合，之后进行挤压处理，获得粒径均一的适配体修饰的α-Gal脂质体。

本发明实施例还提供了一种双特异试剂，其包含前述的适配体修饰的α-Gal脂质体。