[发明专利]一种快速检测溶血性曼氏杆菌的LAMP引物组及其应用在审

申请号：	201810543501.2	申请日：	2018-05-31
公开（公告）号：	CN108660192A	公开（公告）日：	2018-10-16
发明（设计）人：	李军;吴翠兰;彭昊;潘艳;冯世文;陶立;李常挺;钟舒红;马春霞;谢永平;胡帅;贺会利	申请（专利权）人：	广西壮族自治区兽医研究所
主分类号：	C12Q1/6851	分类号：	C12Q1/6851;C12Q1/689;C12Q1/06;C12N15/11
代理公司：	广州市红荔专利代理有限公司 44214	代理人：	李彦孚;何承鑫
地址：	530001 广西壮族***	国省代码：	广西;45
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摘要：
搜索关键词：	溶血性曼氏杆菌快速检测分子生物学技术特异性和敏感性流行病学调查特异性核苷酸特异性检测传统鉴别定量检测检测工具检测结果拷贝数可信度试剂盒检测制备耗时应用费力便利基层
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【权利要求书】：

1.一种快速检测溶血性曼氏杆菌的LAMP引物组，其特征在于，所述LAMP引物组由具有SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的内引物FIP和BIP、具有SEQ ID NO:3和SEQID NO:4所示核苷酸序列的外引物F3和B3、具有SEQ ID NO:5所示核苷酸序列的环引物LB组成。

2.根据权利要求1所述快速检测溶血性曼氏杆菌的LAMP引物组，其特征在于，所述LAMP引物组是依据溶血性曼氏杆菌gcp基因进行设计。

3.根据权利要求1或2所述快速检测溶血性曼氏杆菌的LAMP引物组，其特征在于，所述LAMP引物组在制备检测溶血性曼氏杆菌试剂盒的应用。

4.一种快速检测溶血性曼氏杆菌的LAMP试剂盒，其特征在于，所述LAMP试剂盒包括如权利要求1所述的SEQ ID 1~5所示的核苷酸序列。

5.根据权利要求4所述的快速检测溶血性曼氏杆菌的LAMP试剂盒，其特征在于，所述LAMP试剂盒还包括以下组分：

（1）2×反应缓冲液：包含Buffer、dNTPs、Mg²⁺

（2）Bst DNA聚合酶

（3）超纯水

（4）阳性对照：溶血性曼氏杆菌DNA。

6.根据权利要求4所述的快速检测溶血性曼氏杆菌的LAMP试剂盒，其特征在于，所述的引物组使用浓度为25 pmol/μL。

7.根据权利要求4或5所述的快速检测溶血性曼氏杆菌的LAMP试剂盒，其特征在于，所述LAMP试剂盒的反应程序为63℃恒温保持60 min，扩增结束后85℃灭活5 min，反应在20-25 min出现扩增。

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