[发明专利]丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于，包括下列步骤：

步骤1、供试品溶液的制备：

制备丹参川芎嗪注射液供试品溶液；

步骤2、混合对照品溶液的制备：

精密称取丹参素钠、原儿茶醛、盐酸川芎嗪、异阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸A对照品，混合置于5ml容量瓶中，定容作为混合对照品溶液；

步骤3、测定：

分别精密吸取丹参川芎嗪供试品溶液和混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，按照编辑好的洗脱梯度进行洗脱，记录色谱图；

步骤4、数据处理：

用指纹图谱软件对所得图谱进行处理，即得到丹参川芎嗪注射液指纹图谱。

2.如权利要求1所述的丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤1中丹参川芎嗪注射液供试品溶液的制备，制备方法为：

取丹参川芎嗪注射液一支，用注射器精密量取1.0ml，置于5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容，混合均匀后吸取适量溶液置于高效液相色谱仪的进样瓶中备用。

3.如权利要求1所述的丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤2中混合对照品溶液的制备方法为，精密称取丹参素钠对照品2.3mg，原儿茶醛对照品2.7mg，盐酸川芎嗪对照品2.6mg，异阿魏酸对照品1.0mg，迷迭香酸对照品1.2mg，丹酚酸A对照品2.7mg，混合置于5ml容量瓶中，加入甲醇溶解，并定容至刻度线，超声溶解摇匀，作为混合对照品溶液。

4.如权利要求1所述的丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤3中指纹图谱的液相色谱条件为，色谱柱：华谱Unitary系列C18色谱柱，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱直径为4.6mm，长度为250mm，填料的粒径为5μm；采用二元泵控制流动相比例，以甲醇为流动相A，0.05％磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，具体为：

0到17分钟，甲醇的比例为20％，0.05％磷酸水溶液的比例为80％；

17到23分钟，甲醇的比例由20％均匀上升到27％，0.05％磷酸水溶液的比例由80％均匀下降到73％；

23到50分钟，甲醇的比例由27％均匀上升到45％，0.05％磷酸水溶液的比例由73％均匀下降到55％；

50到80分钟，甲醇的比例由45％均匀上升到65％，0.05％磷酸水溶液的比例由55％均匀下降到35％；

80到90分钟，甲醇的比例由65％均匀上升到100％，0.05％磷酸水溶液的比例由35％均匀下降到0％；

检测波长：254nm；柱温：30℃；体积流量：1.0ml/min。

5.如权利要求1所述的丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于，所述丹参川芎嗪注射液指纹图谱共有8个共有指纹峰，8个共有指纹峰中丹参素钠为1号峰、保留时间为6.439分钟，原儿茶醛为2号峰、保留时间为11.118分钟，盐酸川芎嗪为3号峰、保留时间为13.009分钟，异阿魏酸为4号峰、保留时间为38.559分钟，迷迭香酸为6号峰、保留时间为50.966分钟，丹酚酸A为7号峰、保留时间为58.715分钟。