[发明专利]丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法

说明书

本发明涉及一种丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法，属于中药注射液的指纹图谱分析方法。包括供试品溶液的制备，混合对照品溶液的制备，注入高效液相色谱仪,按照编辑好的洗脱梯度进行洗脱，记录色谱图，用指纹图谱软件对所得图谱进行处理。本发明建立的丹参川芎嗪注射液指纹图谱分析方法，可以快速、灵敏、准确地对丹参川芎嗪注射液的质量进行全面地控制，弥补了丹参川芎嗪注射液质量标准中缺少指纹图谱检查项的不足，为丹参川芎嗪注射液安全性再评价提供相应的技术方法。

技术领域

本发明属于中药注射液的指纹图谱分析方法，具体涉及丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法。

背景技术

丹参川芎嗪注射液是临床上常用的中药注射液之一，该注射液采用水提醇沉法从丹参中提取水溶性成分并和盐酸川芎嗪、甘油均匀混合，加入注射用水制得。丹参是唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge)的干燥根和根茎，从丹参中可以分离得到丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸、咖啡酸、异阿魏酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸A、B、C等水溶性酚酸类成分，其水溶性成分具有增加冠脉流量、抗心肌缺氧的作用。川芎嗪是从川芎根茎中提取的一种活性成分，具有抗血栓、扩张血管等方面的药理作用，盐酸川芎嗪是市售川芎嗪的主要形式之一。目前，丹参川芎嗪注射液主要用于闭塞性脑血管疾病、脑栓塞、及其他缺血性心血管疾病。

丹参川芎嗪注射液的标准收载于《国家药品标准-化学药品地方标准上升国家标准》第十二册，该标准中采用不同的色谱条件分别对注射液中的丹参素和盐酸川芎嗪含量进行测定，但对注射液的单一成分进行含量测定难以全面地反应注射剂的内在质量。中药指纹图谱能够全面、系统地反应中药制剂的整体特征，为中药制剂质量控制提供有效方法，国家药品监督管理局在2002制订《中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南(试行)》，要求对已批准的中药注射剂和申报的新的中药注射剂实行药材和制剂的指纹图谱标准。目前对丹参川芎嗪注射液的文献报道多集中于含量测定，鲜有对其HPLC指纹图谱的报道。为了更有效、更快速的检测注射剂的质量，本发明拟通过对同一生产厂家生产的十批注射液进行分析，建立起丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱，为控制注射剂质量提供可靠的依据。

发明内容

本发明提供一种丹参川芎嗪注射液的HPLC指纹图谱检测方法，解决因注射液中盐酸川芎嗪的含量过高而导致的色谱峰比例失调的问题，该检测方法可以快速、全面、准确的评估参川芎嗪注射液的质量，对控制丹参川芎嗪注射液的质量和保证临床疗效具有重要意义。

本发明采取的技术方案是，包括下列步骤：

步骤1、供试品溶液的制备：

制备丹参川芎嗪注射液供试品溶液；

步骤2、混合对照品溶液的制备：

精密称取丹参素钠、原儿茶醛、盐酸川芎嗪、异阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸A对照品，混合置于5ml容量瓶中，定容作为混合对照品溶液；

步骤3、测定：

分别精密吸取丹参川芎嗪供试品溶液和混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，按照编辑好的洗脱梯度进行洗脱，记录色谱图；

步骤4、数据处理：

用指纹图谱软件对所得图谱进行处理，即得到丹参川芎嗪注射液指纹图谱。

本发明步骤1中丹参川芎嗪注射液供试品溶液的制备，制备方法为：

取丹参川芎嗪注射液一支，用注射器精密量取1.0ml，置于5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容，混合均匀后吸取适量溶液置于高效液相色谱仪的进样瓶中备用。