[发明专利]一种藻蓝蛋白荧光探针及其用于黄曲霉毒素B1快速检测的方法

权利要求书

1.一种藻蓝蛋白荧光探针的制备方法，其特征在于：按摩尔比为10~1:1往pH 为5.0~8.5、浓度为0.01~0.2 M的PBS缓冲液中加入藻蓝蛋白和黄曲霉毒素B1单克隆抗体，振荡混匀，向反应体系中加入体积分数为0.01%~0.5%的交联剂戊二醛，振荡混匀，于10~45℃摇床中匀速振荡，避光反应2~20 h。

2.一种如权利要求1所述的制备方法制得的藻蓝蛋白荧光探针，其特征在于：所述的藻蓝蛋白荧光探针含1~10 μg/mL黄曲霉毒素B1单克隆抗体。

3.一种将权利要求2所述的藻蓝蛋白荧光探针用于黄曲霉毒素B1快速检测的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）用移液枪吸取20~100 μL、0.1-30ng/mL的黄曲霉毒素B1待测样品，再加入10~70 μL藻蓝蛋白荧光探针，混匀，竞争反应2~12 min；

2）将步骤1）的反应液滴加至检测卡孔中，层析时间为5~12 min，将检测卡放入荧光免疫层析快速检测设备中进行检测。

4.根据权利要求3所述的藻蓝蛋白荧光探针用于黄曲霉毒素B1快速检测的方法，其特征在于：步骤2）所述检测卡的制备方法为：取0.01 mol/L、pH=7.0 PBS缓冲液分别稀释牛血清蛋白偶联黄曲霉毒素B1抗原和羊抗鼠二抗分别至0.01~5 mg/L和0.05~10 mg/L，用划膜器具均匀地画在NC膜上，分别为检测线和质控线，于室温下干燥2~12 h；将NC膜、样品垫、吸水垫依次组装在塑料底板上，装入检测卡，并放入密封袋中于4℃下保存以备用。

5.根据权利要求3所述的藻蓝蛋白荧光探针用于黄曲霉毒素B1快速检测的方法，其特征在于：步骤2）所述的荧光免疫层析快速检测设备，设置参数如下：LED灯滤光片波长为500~600 nm；相机滤光片的中心波长为600~750 nm。

6.根据权利要求3所述的藻蓝蛋白荧光探针用于黄曲霉毒素B1快速检测的方法，其特征在于：步骤2）所述的荧光免疫层析快速检测设备设定以下检测条件：LED灯的电压和电流分别为0.1~10 V和0.1~100 mA；相机的曝光时间为0.1~10 s。