[发明专利]一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组、其LAMP检测试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 201810544839.X | 申请日: | 2018-05-30 |
公开(公告)号: | CN108570511A | 公开(公告)日: | 2018-09-25 |
发明(设计)人: | 李杉;王健松;杨佳宁;张瑞玲;张雷 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学;广州白云山医药集团股份有限公司白云山制药总厂 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/14;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/445 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 齐云 |
地址: | 510000*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金黄色葡萄球菌 引物组 快速检测 生物技术领域 检测结果 靶基因 灵敏度 内引物 外引物 准确率 检测 扩增 | ||
1.一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组,其特征在于,其包括有外引物对和内引物对,所述外引物对包括序列如SEQ ID No.1所示的上游引物以及序列SEQ ID No.2所示的下游引物,所述内引物对包括序列如SEQ ID No.3的上游引物以及序列如SEQ ID No.4所示的下游引物。
2.根据权利要求1所述的金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组,其特征在于,还包括有环引物对,所述环引物对包括序列如SEQ ID No.5所示的上游引物以及序列如SEQ ID No.6所示的下游引物。
3.如权利要求1或2所述的LAMP检测引物组在扩增或检测金黄色葡萄球菌中的应用。
4.一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测试剂盒,其特征在于,其包括有如权利要求1或2所述金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组。
5.根据权利要求4所述的金黄色葡萄球菌的LAMP检测试剂盒,其特征在于,其包括有以下一种或多种成分:BstDNA聚合酶、10×反应缓冲液、染料、dNTPs、标准阳性模板以及阴性对照。
6.一种金黄色葡萄球菌的检测方法,其特征在于,其包括以下步骤:利用外引物对和内引物对在LAMP反应体系下,扩增目的基因;
所述外引物对包括序列如SEQ ID No.1所示的上游引物以及序列SEQ ID No.2所示的下游引物;
所述内引物对包括序列如SEQ ID No.3的上游引物以及序列如SEQ ID No.4所示的下游引物。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,该检测方法还包括使用环引物对在LAMP反应体系下,扩增目的基因;
所述环引物对包括序列如SEQ ID No.5所示的上游引物以及序列如SEQ ID No.6所示的下游引物。
8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,在所述LAMP反应体系中,所述外引物与所述内引物的摩尔比为1:(4~5);所述外引物与所述环引物的摩尔比为1:(2~3)。
9.根据权利要求6或7所述的检测方法,其特征在于,在所述LAMP反应体系中,LAMP反应温度为60℃~67℃。
10.根据权利要求6或7所述的检测方法,其特征在于,在所述LAMP反应体系中,包括有镁离子,所述镁离子的反应浓度为5~6mM。
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