[发明专利]一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组、其LAMP检测试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 201810544839.X | 申请日: | 2018-05-30 |
公开(公告)号: | CN108570511A | 公开(公告)日: | 2018-09-25 |
发明(设计)人: | 李杉;王健松;杨佳宁;张瑞玲;张雷 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学;广州白云山医药集团股份有限公司白云山制药总厂 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/14;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/445 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 齐云 |
地址: | 510000*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金黄色葡萄球菌 引物组 快速检测 生物技术领域 检测结果 靶基因 灵敏度 内引物 外引物 准确率 检测 扩增 | ||
本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组,其包括有外引物对和内引物对,其针对金黄色葡萄球菌上的特定区域,利用LAMP技术能够扩增金黄色葡萄球菌上的靶基因,实现金黄色葡萄球菌的快速检测,同时,提升金黄色葡萄球菌检测结果的准确率。此外,本发明还提供一种包括该LAMP检测引物组的金黄色葡萄球菌的LAMP检测试剂盒以及其检测方法,其能够实现金黄色葡萄球菌的快速检测,具有灵敏度高,特异性好的优点。
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体而言,涉及一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组、其LAMP检测试剂盒及其检测方法。
背景技术
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)属于微球菌科葡萄球菌属,是一种革兰氏阳性球菌,广泛分布于自然界,如空气、水、人和动物的排泄物中,是人类化脓性感染和细菌性中毒中最常见的病原体之一,可引起局部化脓性感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至引起败血症、脓毒症等全身感染。近年来,美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占全球感染的第二位,所以金黄色葡萄球菌所引起的疾病已成为全球性的公共卫生问题,严重危害人类安全和健康。而对于金黄色葡萄球菌的感染的快速检验,是指导临床感染治疗用药的关键。
目前对于金黄色葡萄球菌包括耐药菌的检测方法主要是微生物培养及生化鉴定、免疫检测和各种PCR检测等。微生物培养及生化鉴定培养方法是检验金黄色葡萄球菌的经典方法,存在需要专业的实验室,操作繁琐,检测时间长等缺点。目前,多采用PCR技术测到金黄色葡萄球菌,但因技术对模板的数量和质量都有较高的要求,需要热循环及凝胶电泳等设备,价格相对昂贵,很难做到现场快速测定。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组,其利用金黄色葡萄球菌的特定区域,进行LAMP,能够快速、简便且精准地实现金黄色葡萄球菌的扩增。
本发明的第二目的在于提供一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测试剂盒,其利用上述LAMP检测引物组进行LAMP,能够有效缩短检测时间,提高金黄色葡萄球菌检测的准确率。
本发明的第三目的在于提供一种金黄色葡萄球菌的检测方法,其利用上述金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组或其LAMP检测试剂盒进行金黄色葡萄球菌的快速检测,其具有灵敏度高,特异性好的优点。
本发明是这样实现的:
一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组,其包括有外引物对和内引物对,外引物对包括序列如SEQ ID No.1所示的上游引物以及序列SEQ ID No.2所示的下游引物,内引物对包括序列如SEQ ID No.3的上游引物以及序列如SEQ ID No.4所示的下游引物。
根据上述的LAMP检测引物组在扩增或检测金黄色葡萄球菌中的应用。
一种金黄色葡萄球菌的LAMP检测试剂盒,其包括有如上述金黄色葡萄球菌的LAMP检测引物组。
一种金黄色葡萄球菌的检测方法,其包括以下步骤:利用外引物对、内引物对和/或环引物对在LAMP反应体系下,扩增目的基因;
外引物对包括序列如SEQ ID No.1所示的上游引物以及序列SEQ ID No.2所示的下游引物,内引物对包括序列如SEQ ID No.3的上游引物以及序列如SEQ ID No.4所示的下游引物;环引物对包括序列如SEQ ID No.5所示的上游引物以及序列如SEQ ID No.6所示的下游引物。
本发明具有以下有益效果:
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