[发明专利]一种高产5-氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法及应用在审
| 申请号： | 201810545863.5 | 申请日： | 2018-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN108841852A | 公开（公告）日： | 2018-11-20 |
| 发明（设计）人： | 潘韵;陈泽田;仵桂仓;郑文官;李莉玲;沈珊珊 | 申请（专利权）人： | 河南邑鸿善成生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/90;C12N15/54;C12N1/19;C12P13/00;A23K10/18;A23K50/30;A23K50/60;C12R1/865 |
| 代理公司： | 焦作市科彤知识产权代理事务所(普通合伙) 41133 | 代理人： | 聂智良 |
| 地址： | 454950 河南省*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酿酒酵母 构建 高产 重组酿酒酵母 生产菌株 基因 应用 微生物发酵饲料 宿主 氨基乙酰丙酸 基因工程菌株 组成型启动子 质粒线性化 表达载体 动物饲料 基因克隆 绿色环保 电转化 高活性 启动子 转化子 菌株 真核 细菌 克隆 转入 研究 成功 生产 | ||
1.一种高产5-氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法，其特征在于：弱化5-氨基乙酰丙酸生产菌株中琥珀酰辅酶A的合成途径关键酶的活性；所述琥珀酰辅酶A的合成途径关键酶是琥珀酸合成酶。
2.根据权利要求1所述的高产5-氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法，其特征在于：所述弱化是指将琥珀酸合成酶的活性降低为原始活性的40-60%。
3.根据权利要求2所述的高产5-氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法，其特征在于：所述弱化是指将琥珀酸合成酶的活性降低为原始活性的48-50%，最优值为48.17%。
4.根据权利要求2或3所述的高产5-氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法，其特征在于：所述5-氨基乙酰丙酸生产菌株为酿酒酵母。
5.根据权利要求4所述的高产5-氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法，其特征在于：将酿酒酵母中5-氨基乙酰丙酸合成酶hem1基因克隆进入表达载体Prs426；启动子选择组成型启动子TDH3P；此含有hem1基因的质粒线性化后，通过电转化方式转入酿酒酵母；得到的转化子即为高产5-氨基乙酰丙酸酿酒酵母工程菌株。
6.一种高产5-氨基乙酰丙酸生产菌株，其特征在于：所述5-氨基乙酰丙酸生产菌株中琥珀酰辅酶A的合成途径关键酶的活性得到弱化；所述琥珀酰辅酶A的合成途径关键酶为琥珀酸合成酶。
7.一种生产5-氨基乙酰丙酸的方法，其特征在于：从权利要求6所述的5-氨基乙酰丙酸生产菌株的发酵培养体系中获得5-氨基乙酰丙酸。
8.一种微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于：将权利要求6所述的5-氨基乙酰丙酸生产菌株以1%接种量接入固体培养基中，发酵后烘干粉碎。
9.一种权利要求8所述的微生物发酵饲料的制备方法制备的微生物发酵饲料。
10.一种权利要求9所述的微生物发酵饲料在饲料中的应用。
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