[发明专利]一种适用于多种生物样本的DNA提取试剂及其应用在审
| 申请号： | 201810546718.9 | 申请日： | 2018-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN108410864A | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 王世伟;王卿惠;马玺;王颖;翟丽萍;刘军 | 申请（专利权）人： | 齐齐哈尔大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 长沙星耀专利事务所(普通合伙) 43205 | 代理人： | 许伯严 |
| 地址： | 161006 黑*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 离心管 混匀 生物样本 上清液 沉淀 转入 基因组DNA 快速提取 生物组织 水浴处理 提取效率 乙醇洗涤 研磨 石英砂 异丙醇 异戊醇 凉干 氯仿 取水 研钵 冷冻 应用 溶解 细胞 | ||
1.一种DNA提取液，其特征在于，由SDS、EDTA、Tris-HCl、NaCl和β-巯基乙醇组成。
2.根据权利要求1所述的DNA提取液，其特征在于：所述SDS的浓度为3％、EDTA的浓度为150mmol/L、Tris-HCl的浓度为50mmol/L、NaCl的浓度为200mmol/L和β-巯基乙醇的浓度为0.2％V/V。
3.根据权利要求1或2所述的DNA提取液，其特征在于，所述的Tris-HCl pH值为8.0。
4.权利要求1或2所述的DNA提取液在生物组织或细胞DNA提取中的应用。
5.一种DNA提取方法，其特征在于，利用权利要求1或2所述的DNA提取液提取DNA。
6.根据权利要求5所述的DNA提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)用加入石英砂的研钵研磨0.1-1g生物组织或细胞；
(2)加入权利要求1或2所述的DNA提取液混匀，转入1.5mL离心管，65℃、15min，12000rmp、4℃，离心2min；
(3)吸取上清液转至新的1.5ml离心管中，加入等体积KAC混匀，12000rmp、4℃，离心10min；
(4)吸取上清液至新的离心管，加入RNase A，37℃水浴处理30min；
(5)加入氯仿/异戊醇500μL混匀，12000rmp、4℃，离心10min；
(6)取水相，转入预冷冻的含600μL异丙醇的离心管中，12000rmp、4℃，离心10min；
(7)去上清，沉淀凉干，75％乙醇洗涤2次；
(8)加TE buffer溶解沉淀。
7.根据权利要求5或6所述的DNA提取方法，其特征在于，所述的生物组织或细胞来自于动物、植物或微生物。
8.根据权利要求5或6所述的DNA提取方法，其特征在于，所述的生物组织或细胞为0.3g。
9.根据权利要求5或6所述的DNA提取方法，其特征在于，所述的KAC浓度为1.5mol/L。
10.根据权利要求5或6所述的DNA提取方法，其特征在于，所述的氯仿/异戊醇体积比为24：1。
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