[发明专利]一种利用微生物制备环孢菌素的方法有效
| 申请号： | 201810548403.8 | 申请日： | 2018-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN108727473B | 公开（公告）日： | 2021-11-19 |
| 发明（设计）人： | 苏丹;施宏梅;吕国忠 | 申请（专利权）人： | 大连民族大学 |
| 主分类号： | C07K7/64 | 分类号： | C07K7/64;C12P21/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235 | 代理人： | 李楠 |
| 地址： | 116600 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 微生物 制备 菌素 方法 | ||
1.一种利用微生物制备环孢菌素的方法，其特征在于，包括如下顺序的步骤：
（1）活化地生弯颈霉菌C41-3：将地生弯颈霉菌C41-3接种在灭菌的PDA培养基上，置于25℃的常温培养箱，培养7天；
所述的PDA培养基配方为：马铃薯100g、葡萄糖10g、琼脂10g、水500mL；
（2）制备种子液：将活化后的地生弯颈霉菌C41-3置于原液体培养基中，在28℃、120r/min培养5d得到种子液；
所述原液体培养基配方为：葡萄糖50g，蛋白胨10g，KNO3 2g，MgSO4 2g，CaCl2 0.1g，（NH4）3PO4∙3H2O 2g，水1000mL，装液量为2/5；
（3）制备发酵液：将种子液按8vt%的接种量接种于察氏液体培养基中，在24℃、120r/min条件下摇床培养5d得到发酵液；
所述察氏液体培养基的配方为蔗糖30g，NaNO3 3g，K2HPO4 1g，MgSO4 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4 0.01g，水1000mL，pH为5.0，所述察氏液体培养基的装液量为2/5；
（4）环孢菌素的制备：
向发酵液中加入等体积的乙酸乙酯，将发酵液和菌丝体全部浸泡；在 24℃、120r/min条件下摇床培养24h后，超声震荡30min，静置待分层后取出上层有机相，静置、过滤、浓缩得到环孢菌素；
所述的地生弯颈霉菌C41-3保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO.15667。
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