[发明专利]一种皮革和毛皮中孔雀石绿的检测方法

权利要求书

1.一种皮革和毛皮中孔雀石绿的检测方法，其特征在于，依次包括以下步骤： 样品脱脂处理、样品萃取、高效液相色谱-串联质谱检测和含量计算。

2.根据权利要求1所述的一种皮革和毛皮中孔雀石绿的检测方法，其特征在于，各步骤的操作如下：

样品脱脂处理：准确称取1.0g剪碎成约的2mm×2mm尺寸或粉碎后的样品颗粒，置于管状瓶中，加入20 mL正己烷，盖上密封盖后在超声波浴中进行超声脱脂，脱脂后，滗掉正己烷，将样品置于敞口的容器中挥干剩余正己烷；

样品萃取：往挥干后的试样中准确移取10 mL的有机溶剂A，于超声波浴中萃取一定的时间，萃取液过0.22 μm聚四氟乙烯过滤膜至进样瓶，得样品溶液；

高效液相色谱-串联质谱检测及含量计算：选择CAS号为2437-29-8的孔雀石绿标准品作为定量基质，用溶剂A配制该孔雀石绿的系列标准工作溶液；在设定好的高效液相色谱-串联质谱参数条件下，依次将孔雀石绿系列标准工作溶液和样品溶液注入高效液相色谱-串联质谱中进行检测；根据孔雀石绿系列标准工作溶液的峰面积绘制工作曲线，将样品溶液中的孔雀石绿峰面积带入工作曲线，计算样品中孔雀石绿的含量。

3.根据权利要求2所述的一种皮革和毛皮中孔雀石绿的检测方法，其特征在于，所述的样品脱脂处理的超声波浴的条件为温度40℃～50℃，超声频率40Hz，脱脂时间至少20 min。

4.根据权利要求2所述的一种皮革和毛皮中孔雀石绿的检测方法，其特征在于，所述的挥干剩余正己烷的方法为氮气缓慢吹干、氩气缓慢吹干、氦气缓慢吹干和自然挥发干的任一种。

5.根据权利要求2所述的一种皮革和毛皮中孔雀石绿的检测方法，其特征在于，所述的有机溶剂A为含1%（体积比）甲酸的乙腈。

6.根据权利要求2所述的一种皮革和毛皮中孔雀石绿的检测方法，其特征在于，所述的样品萃取的超声波浴的条件为室温，超声频率40Hz，萃取时间至少20min；

根据权利要求2所述的一种皮革和毛皮中孔雀石绿的检测方法，其特征在于，所述的高效液相色谱-串联质谱参数条件如下：

液相色谱柱：ZORBAX SB-C₁₈柱（2.1 mm×150 mm，3.5 μm）或相当色谱柱；

柱温：30℃；

进样体积：10 µL；

流动相：乙腈：含0.1%甲酸的5 mmol/L乙酸铵溶液=70：30；

流速：0.35 ml/min；

离子源：ESI，离子化方式ES(+)；

离子喷雾电压：4000V；

干燥气温度：350℃；

干燥气流速：10 L/min；

雾化器压力：35 psi；

采集方式：多反应监测（MRM）；

定量离子对及其MRM采集参数：m/z 329.3﹥313.2, 碎裂电压为120V，碰撞能量为42eV；

定性离子对及其MRM采集参数：m/z 329.3﹥208.2, 碎裂电压为120V，碰撞能量为50eV。