[发明专利]一种自组装的纳米佐剂及由该佐剂形成的纳米疫苗的制备方法与应用在审
| 申请号： | 201810566069.9 | 申请日： | 2018-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN108714213A | 公开（公告）日： | 2018-10-30 |
| 发明（设计）人： | 盛望;梁皓;邓雄威;肖向茜;沈思嗣 | 申请（专利权）人： | 北京工业大学 |
| 主分类号： | A61K39/39 | 分类号： | A61K39/39;A61P37/04;A61K39/125;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京思海天达知识产权代理有限公司 11203 | 代理人： | 刘萍 |
| 地址： | 100124 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 佐剂 纳米疫苗 自组装 寡脱氧核苷酸 制备 诱导 体内 鱼精蛋白硫酸盐 体液免疫反应 细胞免疫反应 羧甲基葡聚糖 生物利用率 自组装材料 病毒抗原 应用提供 降解 小鼠 应用 帮助 | ||
1.一种自组装的纳米佐剂，其特征在于，该佐剂包括纳米自组装材料和负载在该纳米材料中的CpG寡脱氧核苷酸。
2.根据权利要求1所述的纳米佐剂，其特征在于，所述的纳米自组装材料为羧甲基葡聚糖和鱼精蛋白硫酸盐，鱼精蛋白硫酸盐：羧甲基葡聚糖的质量比为0.4:1～1:1。
3.根据权利要求2所述的纳米自组装材料，其特征在于，所述的羧甲基葡聚糖取代度>50％,分子量为20-110KDa；所述的鱼精蛋白硫酸盐来源于鲑鱼。
4.根据权利要求1所述的纳米佐剂，其特征在于，所述的CpG寡脱氧核苷酸为任意人或鼠特异性CpG寡脱氧核苷酸，所述羧甲基葡聚糖与CpG寡脱氧核苷酸的质量比为10:1～160:1。
5.如权利要求1所述的纳米佐剂，其特征在于经过下列方法制备：
(1)用去离子水制备羧甲基葡聚糖溶液，并过0.22μm的微孔滤膜，羧甲基葡聚糖溶液浓度为0.5-3mg/mL；
(2)用去离子水制备鱼精蛋白硫酸盐溶液，并过0.22μm的微孔滤膜，鱼精蛋白硫酸盐溶液浓度为0.3-1.8mg/mL；
(3)将CpG寡脱氧核苷酸溶于上述(1)中的羧甲基葡聚糖溶液中,CpG寡脱氧核苷酸终浓度为0.2-0.0125mg/mL；
(4)将上述(2)中的鱼精蛋白硫酸盐溶液逐滴滴加到上述(3)中的溶液中，使用磁力搅拌器持续搅拌5-60min，放置稳定，离心，去除上清液，分散，用超纯水复溶，即得包载CpG寡脱氧核苷酸的纳米佐剂。
6.一种纳米疫苗，所述的纳米疫苗包含有如权利要求1所述纳米佐剂包裹病毒抗原。
7.如权利要求6所述的纳米疫苗，所述病毒抗原包括：灭活病毒或重组蛋白。
8.根据权利要求6所述的纳米疫苗，其特征在于，病毒抗原与CpG寡脱氧核苷酸的质量比为1:2～4:1。
9.制备如权利要求6所述的纳米疫苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)用去离子水制备羧甲基葡聚糖溶液，并过0.22μm的微孔滤膜，羧甲基葡聚糖溶液浓度为0.5-3mg/mL；
(2)用去离子水制备鱼精蛋白硫酸盐溶液，并过0.22μm的微孔滤膜，鱼精蛋白硫酸盐溶液浓度为0.3-1.8mg/mL；
(3)将病毒抗原与CpG寡脱氧核苷酸溶于上述(1)中的羧甲基葡聚糖溶液中,其中，病毒抗原终浓度为0.4-0.025mg/m；CpG寡脱氧核苷酸终浓度为0.2-0.0125mg/mL；
(4)将上述(2)中的鱼精蛋白硫酸盐溶液逐滴滴加到上述(3)中的溶液中，使用磁力搅拌器持续搅拌5-60min，放置稳定，离心，去除上清液，分散，用超纯水复溶，即得包载病毒抗原与CpG寡脱氧核苷酸的纳米疫苗。
10.权利要求1-8中任一项中所述的一种自组装的纳米佐剂或纳米疫苗的用途，其特征在于,用于预防性及治疗性疫苗领域的应用。
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