[发明专利]一种检测艰难梭菌用培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种检测艰难梭菌用培养基，其特征在于：所述培养基的组分包括胰酪蛋白胨2-30g.L^-1，月示蛋白胨1-30g.L^-1，酵母浸出物0.5-20g.L^-1，甘露醇1-15g.L^-1，氯化钠0.1-10g.L^-1，硫酸镁0.1-5g.L^-1，孢子诱发剂0.1-10g.L^-1，还原剂0.2-10g.L^-1，抑菌剂0.01-1g.L^-1，七叶苷25-500mg.L^-1，柠檬酸铁20-500mg.L^-1。

2.根据权利要求1所述的检测艰难梭菌用培养基，其特征在于：所述孢子诱发剂为胆盐或氨基酸。

3.根据权利要求2所述的检测艰难梭菌用培养基，其特征在于：所述孢子诱发剂为牛磺胆酸钠、甘氨酸或丙氨酸。

4.根据权利要求1所述的检测艰难梭菌用培养基，其特征在于：所述还原剂为L-半胱氨酸、亚硫酸钠、巯基乙酸、抗坏血酸、亚硫酸铁、硫化亚铁、组氨酸或丙酮酸盐中一种或两种以上。

5.根据权利要求4所述的检测艰难梭菌用培养基，其特征在于：所述还原剂的浓度为0.5g.L^-1-5g.L^-1。

6.根据权利要求1所述的检测艰难梭菌用培养基，其特征在于：所述抑菌剂为氨曲南、头孢西丁、克林霉素、阿米卡星、卡那霉素、D-环丝氨酸、头孢他啶、环丙沙星、氟康唑、制霉菌素或两性霉素B。

7.根据权利要求6所述的检测艰难梭菌用培养基，其特征在于：所述抑菌剂的浓度为0.016-0.5g.L^-1。

8.权利要求1所述检测艰难梭菌用培养基的制备方法，其特征在于：包括下述步骤：

第一步，准确称取柠檬酸铁，加入20%纯化水，加热使之完全溶解，得到A液；

第二步，准确称取胰酪蛋白胨、月示蛋白胨、酵母浸出物、甘露醇、氯化钠、硫酸镁、还原剂和七叶苷，加入70%纯化水，搅拌使其完全溶液，得到B液；

第三步，准确称取孢子诱发剂、抑菌剂，加入10%纯化水完全溶解后，用0.22μm孔径滤膜过滤后得到C液；

第四步，将第一步得到的A液和第二步得到的B液混合均匀，调节pH值7.4±0.2，116℃灭菌10min，得到D液；

第五步，待D液降温至40℃以下，无菌操作加入第三步得到的C液，混合均匀后得到成品培养基，装瓶、密封， 2-8℃冷藏或0℃以下冻存。

9.根据权利要求8所述的检测艰难梭菌用培养基的制备方法，其特征在于：第五步装瓶时，其灌装体积≥2/3瓶体满口容积，灌装液面高度≥20mm。