[发明专利]一种用于消化道癌诊断、检测或筛查的引物和探针组有效
| 申请号： | 201810567925.2 | 申请日： | 2018-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN108796078B | 公开（公告）日： | 2022-07-26 |
| 发明（设计）人： | 赵国栋 | 申请（专利权）人： | 苏州唯善生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 刘妍妍 |
| 地址： | 215300 江苏省苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 消化道 诊断 检测 引物 探针 | ||
1.用于消化道癌诊断、检测或筛查的引物和探针组作为制备食管癌和胃癌的早期诊断或检测或筛查的试剂的应用，其特征在于，所述的引物包含SFRP2的正向引物和反向引物，所述的探针为SFRP2探针，SFRP2正向引物包含SEQ ID: 5的序列，SFRP2反向引物包含SEQID: 23的序列， SFRP2探针包含SEQ ID: 34的序列；SFRP2探针标记的荧光为FAM；
检测用的DNA模板为经过9M的亚硫酸氢盐转化后的DNA；
所用的亚硫酸氢盐溶液为9M亚硫酸氢铵溶液，反应条件为90℃加热30分钟；
待检测的生物样本为血液、粪便、组织、尿液或其它可提取DNA的生物样本；
所述的引物和探针组用于荧光定量PCR，PCR反应体系为：
组分 终浓度
PCR反应缓冲液 1 X
DNA聚合酶 0.15U/μL
dNTPs混合液 0.2mM
Mg2+ 8mM
SEQ ID NO:5 0.5µM
SEQ ID NO:23 0.5µM
SEQ ID NO:34 0.1µM
去离子水 补水至15µL
转化后DNA模板 15µL
PCR反应条件为：
循环数 温度 时间
1个循环 95℃ 20min
95℃ 10 s
50个循环 58℃ 30 s
70℃ 10 s
1个循环 40℃ 30 s。
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