[发明专利]螺虫乙酯抗原及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及化合物制备与应用技术领域，特别涉及一种螺虫乙酯抗原及其制备方法与应用，结构通式X为CH₂、CO基团中的一种，n为0‑6的整数；Protein表示载体蛋白，所述载体蛋白选自牛血清蛋白、卵清蛋白和血蓝蛋白中至少一种。是螺虫乙酯与载体蛋白通过酰胺键连接形成的偶联物；所述酰胺键是式C上的羧基通过活泼酯与载体蛋白上的氨基形成的；制备用于检测样品中螺虫乙酯的酶联免疫试剂盒、螺虫乙酯的发光免疫试剂盒或免疫亲和色谱柱中的应用。该方法能够方便、快捷地获得螺虫乙酯抗原，合成步骤简洁明了、合成成本低，效果好。

技术领域

本发明涉及化合物制备与应用技术领域，特别涉及一种螺虫乙酯抗原及其制备方法与应用。

背景技术

螺虫乙酯(spirotetramat)是由德国拜耳公司开发研制的新颖内吸型季酮酸类杀虫剂，属于高效广谱杀虫剂，可有效防治各种刺吸式口器害虫。螺虫乙酯为低毒性杀虫剂，在土壤中易降解，可有效防治木虱、粉虱、介壳虫、棉盲蝽等害虫。其化学结构式如下：

2007年10月，拜耳公司在英国格拉斯哥植保会议上介绍了螺虫乙酯，2007年底，螺虫乙酯在突尼斯获准在全球的首个登记。2008年，拜耳在美国和加拿大登记并上市了螺虫乙酯，继而在哥伦比亚、墨西哥、土耳其和新西兰等国家登记上市。2011年3月16日，螺虫乙酯在中国正式登记上市。螺虫乙酯的销售额逐年上升，从2008年的不足0.3亿美元已经上升到2012年为1.40亿美元。随着螺虫乙酯的大量使用，其残留问题也引起人们的关注。虽然螺虫乙酯属于低毒性杀虫剂，但是从环境安全性评价来说，螺虫乙酯难挥发、难光解，在土壤中可以被降解，但是其降解产物在土壤中有一定的移动性，很容易交叉污染。

目前，螺虫乙酯在农产品中的残留检测方法主要是高效液相色谱法(HPLC)和高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS)尽管仪器法检测具有灵敏度高、准确可靠等优点，但样品前处理繁琐，检测时间长，耗资大，技术性要求高，且仪器昂贵，不适合大量样品的快速检测，也不具备现场快速检测的能力。与仪器分析法相比，免疫分析法具有快速、简便、实时、易于进行现场检测、样品前处理简单、灵敏度高、选择性强、适合于高通量分析等优点，而且还能大幅度降低检测成本。

发明内容

本发明针对现有技术的缺陷，提供了一种螺虫乙酯抗原及其制备方法与应用，能有效的解决上述现有技术存在的问题。

为了实现以上发明目的，本发明采取的技术方案如下：

一种螺虫乙酯抗原，其结构通式如式A所示，

所述式A中，X为CH₂、CO基团中的一种，n为0-6的整数；Protein表示载体蛋白，所述载体蛋白选自牛血清蛋白、卵清蛋白和血蓝蛋白中至少一种。

该螺虫乙酯抗原的制备方法，螺虫乙酯抗原是螺虫乙酯与载体蛋白通过酰胺键连接形成的偶联物；所述酰胺键是式C上的羧基通过活泼酯与载体蛋白上的氨基形成的。包括如下步骤：

步骤1，将螺虫乙酯水解得到式B所示化合物；

步骤2，将式B化合物与式C所示同时含有氨基和羧基的化合物进行反应得到式D所示化合物；

Y-X-(CH₂)n-COOH

式C结构式

所述式C和式D中，X为CH₂、CO基团中的一种，Y为Cl、Br和I基团中的一种，n为0-6的整数；

步骤3，式D所示化合物和N-羟基琥珀酰亚胺在二环己基碳二亚胺或1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐存在的条件下进行偶联反应得到式E所示化合物；