[发明专利]一种检验柠檬黄染色蒲黄的检测方法

说明书

一种检验柠檬黄染色蒲黄的检测方法，属于药品检测技术领域，通过多次实验探索研究之后筛选出来的能够达到准确度高、精密度高、检出限低、稳定性好等目的。本发明扩大了对中药蒲黄的非法染色检测范围，可以更好地保证中药的质量安全，为蒲黄非法染色的检测提供技术储备；同时采用薄层色谱、高效液相色谱、液质联用技术，操作简单、检测效率高、准确度高、精密度高，且具有良好的稳定性和重现性；便于中药生产企业，中药检验部门能够准确判断蒲黄是否存在柠檬黄染色问题。

技术领域

本发明属于药品检测技术领域，特别是涉及到一种中药材蒲黄中柠檬黄色素染色的检测方法。

背景技术

柠檬黄，又称酒石黄、酸性淡黄、肼黄。化学名称为1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)-5-吡唑啉酮-3-羧酸三钠盐，为水溶性合成色素。呈鲜艳的嫩黄色，是单色品种。多用于食品、饮料、化妆品、饲料、烟草、玩具、食品包装材料等的着色，也用于羊毛、蚕丝的染色。用色素对中药蒲黄进行染色是近年来一些不法商贩常采用的对不合格样品处理的方法，由于利益的驱动，他们将蒲黄植物经的非药用部位粉碎成与蒲黄性状相似的粉末状，用色素染成黄色，或掺入淀粉、泥沙等再用色素染成黄色，冒充蒲黄进行销售。由于使用的色素成分不是蒲黄应有的成分，给广大患者用药安全带来一定风险。蒲黄染色过去多用化工原料金胺O，但由于近年来药监部门加大了中药非法染色的打击力度，金胺O染色现象有所减少，但仍有一些不法商贩将蒲黄伪品用柠檬黄非法染色。因此现有技术当中亟需要一种新型的技术方案来解决这一问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种检验柠檬黄染色蒲黄的检测方法，以便于中药生产企业，中药检验部门能够准确判断蒲黄是否存在柠檬黄染色问题。

一种检验柠檬黄染色蒲黄的检测方法，其特征是：包括以下步骤，且以下步骤顺次进行，

步骤一、取待测粉末2g，称定后加入浓度为70％的乙醇溶液20ml，超声处理20分钟，静止自然冷却，加入浓度为70％的乙醇溶液补足超声处理减失的重量，离心后取上清液作为供试品溶液；

步骤二、取对照试剂柠檬黄2g，加入浓度为70％的乙醇溶液，制备为每1ml溶液含0.5mg对照试剂的溶液，作为照品溶液；

步骤三、取供试品溶液10μl～20μl，照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，采用体积分数比为1：3：3：1：1的乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水溶液为展开剂展开，取出晾干，观察样品色谱中，在与对照试剂色谱相对应的位置上的斑点颜色；

步骤四、斑点颜色相同，采用高效液相色谱法验证

A、对照试剂溶液的制备

称取对照试剂柠檬黄2g，加入浓度为70％的乙醇溶液，制备为每1ml溶液含25μg对照试剂的溶液，摇匀，作为对照试剂溶液；

B、样品溶液的制备

称取蒲黄药材粉末2g，加入浓度为70％的乙醇溶液20ml，超声处理20分钟，静止自然冷却，加入浓度为70％的乙醇溶液补足超声处理减失的重量，离心后取上清液作为样品溶液；

C、测定结果分析

分别取样品溶液和对照试剂溶液各10μl，注入液相色谱仪测定，测定结果中出现色谱峰与对照试剂保留时间不同，测定结束；测定结果中出现色谱峰与对照试剂保留时间相同，采用二极管阵列检测器对比相应色谱峰在200nm～600nm波长范围的紫外可见吸收光谱,光谱不同，测定结束；

步骤五、采用高效液相色谱与质谱联用进行进一步测定

选择250mm色谱柱，采用乙腈-0.02mol/L醋酸流动相系统，质谱检测结果通过吸收光谱在400nm～450nm为最大吸收峰判定。