[发明专利]一种快速鉴定锈斑蟳性别特异分子标记和遗传性别的方法有效
| 申请号： | 201810572161.6 | 申请日： | 2018-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN108588238B | 公开（公告）日： | 2022-03-22 |
| 发明（设计）人： | 马洪雨;方少彬;管梦云;苗贵东;石西 | 申请（专利权）人： | 汕头大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 张泽思;曹江 |
| 地址： | 515000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 鉴定 锈斑 性别 特异 分子 标记 遗传性 别的 方法 | ||
1.一种鉴定锈斑蟳遗传性别的方法，其特征在于，利用雄性特异性引物在特定的退火温度下对锈斑蟳的基因组DNA进行PCR扩增，并根据琼脂糖凝胶电泳检测结果进行遗传性别判定；所述雄性特异性引物有两对，两对所述雄性特异性引物的核苷酸序列分别为：
引物1
正向引物SEX-F1： 5' CTTGGTTTGTCAGGAAACTGGCTCG 3'
反向引物SEX-R1： 5' GAGAGAGCATGCTCTCAGCTATTACGG 3'；
引物2
正向引物SEX-F2： 5' GTCAGATTTGGATGGAAATAGTCTATTA 3'
反向引物SEX-R1： 5' GAGAGAGCATGCTCTCAGCTATTACGG 3'；
根据电泳条带判定锈斑蟳性别，如果相应泳道无条带则判定该个体为雌性；利用引物1扩增时，如果相应泳道有一条256bp的条带，或利用引物2扩增时相应泳道有一条205bp的条带，则判定该个体为雄性；
所述引物1特定退火温度为：63 ℃，所述引物2特定退火温度为50 ℃。
2.根据权利要求1所述鉴定锈斑蟳遗传性别的方法，其特征在于，所述方法还包括设计一对PCR引物，以所述PCR引物作为性别鉴定引物的对照引物。
3.根据权利要求2所述鉴定锈斑蟳遗传性别的方法，其特征在于，所述PCR引物的核苷酸序列为：
C-F：5' CGATCAATTCTTGGTTTGTCAGG 3'
C-R：5' TCGCTACTTATTGCATCCGAG 3'。
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