[发明专利]一种双核铀酰配合物在ATP分析中的应用在审
申请号: | 201810574952.2 | 申请日: | 2018-06-06 |
公开(公告)号: | CN108776113A | 公开(公告)日: | 2018-11-09 |
发明(设计)人: | 肖锡林;许丽;蒋敏;廖力夫;王娇;彭鹏程 | 申请(专利权)人: | 南华大学 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N21/64 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 俞晓明 |
地址: | 421001 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 配合物 底液 双核 生物化学分析检测 标准曲线 待测样品 散射光谱 最优条件 缓冲液 精准度 波长 称取 滴加 加水 检出 稀释 配制 应用 溶解 绘制 分析 | ||
1.一种双核铀酰配合物在ATP分析中的应用,其特征在于,所述双核铀酰配合物为BUIPTP,该应用包括以下步骤:
步骤1,确定检测ATP的最优条件:
1-1,在比色管中加入已知浓度的ATP溶液得到待测ATP溶液;
1-2,配制BUIPTP检测底液;
1-3,配制标准品溶液:
在搅拌下将BUIPTP检测底液滴加到待测ATP溶液中,得到ATP标准溶液;
1-4,用荧光分光光度计测定不同激发波长下ATP标准溶液二级散射光谱强度,确定检测ATP的最佳波长;
1-5,配制不同pH的缓冲溶液,将不同pH的缓冲溶液加入ATP标准溶液中,在最佳波长下测定体系二级散射光谱,确定检测ATP的最佳pH;
1-6,将ATP标准溶液孵育0-50min,在最佳波长及pH条件下测定二级散射光谱,确定检测ATP的最佳孵育时间;
1-7,在最优条件下,检测不同浓度的ATP的二级散射光谱;
步骤2,绘制测定ATP的标准曲线:
以ATP的浓度为横坐标,以二级散射光强度为纵坐标绘制测定ATP的标准曲线;
步骤3,样品中ATP含量的分析:
3-1,称取含有ATP的待测样品,加水溶解或稀释,并加入缓冲液以达到最佳pH,得到待测样品溶液;
3-2,在搅拌下将BUIPTP检测底液滴加到待测样品溶液中,得到标准品溶液,孵育0-50min;
3-3,在最佳波长处测定孵育后的标准品溶液的二级散射光谱强度;
3-4,从标准曲线中查找出所述样品中的ATP浓度,并计算出样品中的ATP含量。
2.如权利要求1所述的双核铀酰配合物在ATP分析中的应用,其特征在于,配制BUIPTP检测底液的过程为:准确称取BUIPTP固体,加入二次蒸馏水溶解,转移至容量瓶,定容,摇匀即得。
3.如权利要求1所述的双核铀酰配合物在ATP分析中的应用,其特征在于,步骤1-7中的ATP溶液的浓度分别为0,50,100,200,300,400和500nmol·L-1。
4.如权利要求1所述的双核铀酰配合物在ATP分析中的应用,其特征在于,所述BUIPTP的结构式如下:
5.如权利要求1所述的双核铀酰配合物在ATP分析中的应用,其特征在于,步骤1-4确定的最佳波长为:激发波长283nm、发射波长为566nm,步骤1-5确定的最佳pH为7,所述缓冲溶液为Tris-HCl缓冲液,步骤1-6确定的最佳孵育时间为30min。
6.如权利要求5所述的双核铀酰配合物在ATP分析中的应用,其特征在于,步骤3-2中的孵育时间为30min。
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