[发明专利]苯硼酸修饰的近红外方酸染料及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种苯硼酸修饰的近红外方酸染料及其制备方法和应用，其是将吲哚修饰的苯硼酸衍生物和二氰基乙烯基方酸衍生物混合，经溶解、回流、减压蒸除溶剂及硅胶柱层析纯化，制得所述近红外方酸染料。该方酸染料具有较好的稳定性及优异的光学性能，尤其是对位取代的苯硼酸基团，可与ATP分子中的顺式二醇部分结合，故可通过染料、ATP和CTAB分子之间的多重静电作用，引发染料吸收光谱和荧光光谱的改变，从而可作为ATP检测的荧光探针，用于细胞内ATP的荧光成像检测，且该探针具有较好的生物相容性和细胞通透性、较低的生物毒性，对ATP具有较好的检测灵敏度。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种苯硼酸修饰的近红外方酸染料及其制备方法与其在荧光成像检测细胞内ATP中的应用。

背景技术

腺苷5'-三磷酸（ATP）由腺嘌呤、核糖和三个磷酸基团组成。ATP不仅是活细胞中通用的能量货币，也是参与三磷酸循环、离子通道、神经传递、细胞分裂、DNA合成等多种生物过程的信号传导介质（Xu, Z.; Singh, N. J.; Lim, J. et al. Unique sandwichstacking of pyrene-adenine-pyrene for selective and ratiometric fluorescentsensing of ATP at physiological pH. Journal of the American Chemical Society,2009, 131(42), 15528-15533. Ashcroft, F. M.; Gribble, F. M. ATP-sensitive K⁺channels and insulin secretion: their role in health and disease.Diabetologia, 1999, 42, 903-919. Burnstock, G. Historical review: ATP as aneurotransmitter. Trends in Pharmacological Sciences, 2006, 27, 166-176.Shen, X.; Mizuguchi, G.; Hamiche, A. et al. A chromatin remodelling complexinvolved in transcription and DNA processing. Nature, 2000, 406(6795), 541.）。此外，ATP的异常水平与缺血、低血糖帕金森病和心血管疾病等几种病理状态密切相关(Bush, K. T.; Keller, S. H.; Nigam, S. K. Genesis and reversal of theischemic phenotype in epithelial cells. The Journal of Clinical Investigation, 2000, 106(5), 621-626. Przedborski, S.; Vila, M. MPTP: areview of its mechanisms of neurotoxicity. Clinical Neuroscience Research,2001, 1(6), 407-418. Mäkelä, A.; Kuusi, T.; Schröder, T. Inhibition of serumphospholipase-A2 in acute pancreatitis by pharmacological agents in vitro.Scandinavian Journal of Clinical and Laboratory Investigation, 1997, 57(5),401-407.)。因此，建立简单、快速、灵敏和准确的ATP分析方法对于医学临床诊断及机体代谢水平研究具有重要意义，同时在肿瘤药物敏感性筛选、细胞凋亡检测、多种重要细胞活性及微生物含量分析等方面具有重要的价值。