[发明专利]一种3-O-氨基甲酰甘露糖供体衍生物、博来霉素二糖及其前体的制备方法

说明书

本发明公开了一种3‑O‑氨基甲酰甘露糖供体衍生物的制备方法，包括对甲基‑α‑甘露糖苷3‑羟基进行选择性苄基化、乙酰化、脱苄和氨基甲酰化系列反应。同时，本发明还公开了利用所述方法制备得到的3‑O‑氨基甲酰甘露糖供体衍生物为供体制备博来霉素二糖及其前体的方法。本发明3‑O‑氨基甲酰甘露糖供体衍生物的制备方法具有保护与去保护选择性高、路线短、产率高的优势，同时解决了博来霉素二糖及其前体产率偏低、反应可操作性与重复性差，不宜工业化等不足等难题，具有原料廉价易得、产率高、可操作性强、条件易控、可工业化放大和高效低成本等优点。

技术领域

本发明属于医药化工技术领域，具体涉及一种3-O-氨基甲酰甘露糖供体衍生物、博来霉素二糖及其前体的制备方法。

背景技术

博来霉素(Bleomycins，BLM)为临床上一线治疗肿瘤的糖肽类抗肿瘤抗生素药物，主要用来治疗鳞癌、霍奇金氏恶性淋巴瘤、宫颈癌和睾丸癌等，来源于一种轮枝链霉菌(Streptomyces verticillus)。BLM结构由三部分组成：1)5个氨基酸组成嘧啶-咪唑结构；2)1个含有二噻唑氨基的侧链；3)1个特有二糖结构。大量研究表明，嘧啶-咪唑结构是BLM抗肿瘤作用关键部位，能选择性氧化裂解DNA中的5’-GC-3’和5’-GT-3’序列,进而发挥抗肿瘤活性；二噻唑平面结构可插入到DNA碱基对之间，形成夹层络合物，是结合DNA的必须片段；二糖部分不直接参与BLM与DNA直接作用，对BLM的抗肿瘤作用机制尚不确切，Shen等开发了含有6-去氧-L-古洛糖-α-1,2-[3-O-氨甲酰基-D-甘露糖]片段的博来霉素二糖类似物，其裂解DNA的活性能力明显增强，表明BLM二糖结构细微变化对博来霉素与DNA的直接作用产生潜在影响(具有明显提高DNA裂解活性的博来霉素设计，美国化学协会杂志，2012，134，13501-13509)。最近发现，BLM二糖能选择性区分肿瘤细胞与正常细胞，增加BLM的细胞渗透性，提高肿瘤细胞对BLM的摄取，具有明显的肿瘤靶向性(博来霉素二糖促进肿瘤细胞摄取，美国化学协会杂志，2014，136，13641-13656)，这可能是临床上BLM化疗时，不产生骨髓抑制作用，不引起白细胞减少，不抑制机体免疫功能的重要原因之一。

BLM二糖是一种结构独特稀有的天然二聚糖，由3-O-氨甲酰基-D-甘露糖和L-古洛糖组成，之间由α-1,2-糖苷键链接。Hecht与其同事报道博来霉素二糖对某些肿瘤细胞具有较强的亲和力，具有作为肿瘤识别显影剂或者靶向给药的结构片段与载体的潜质(博来霉素二糖修的饰能改善靶向肿瘤特异性，生物化学，2014,53,6800-6810)，为了进一步理解BLM二糖构效关系及具体生物学作用机制，开发特异性识别肿瘤的显影剂和基于BLM二糖靶向抗肿瘤药或递送系统，用化学合成法制备BLM二糖及其前体受到越来越多的关注。

BLM二糖及其前体模块的合成分为三步，第一步合成2-位羟基裸露L-古洛糖衍生物作为受体，第二步合成3-O-氨甲酰甘露糖衍生物作为供体，最后立体选择性地构建具有α型糖苷的BLM二糖前体，按需求安装到目标分子上，或脱去保护基团制备BLM二糖。尽管最近吕伟课题组报道山梨醇头尾翻转能克级制备BLM，但路线中乙醛保护的山梨醇选择性差，最理想的产率仅为17％，且纯化困难，影响其更大规模的制备(二种抗生素抗肿瘤博来霉素二糖合成，四面体，2017,73,6172-6180)。

综上所述，在过去三十多年已有多个研究组报道博来霉素二糖合成方法改进，但进展缓慢，其合成规模几乎均处于毫克级水平，而且这些方法路线长，产率偏低、反应可操作性与重复性差，不宜工业化等不足。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供3-O-氨基甲酰甘露糖供体衍生物的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种3-O-氨基甲酰甘露糖供体衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将甘露糖甲醇溶液在酸催化下成醚得到甲基-α-甘露糖(M-2)；