[发明专利]一种促进马铃薯幼苗壮根的植物组织培养方法有效
申请号: | 201810584849.6 | 申请日: | 2018-06-06 |
公开(公告)号: | CN108552059B | 公开(公告)日: | 2020-01-17 |
发明(设计)人: | 陈道甫;林心灵;杨辉艳;马星;何子元 | 申请(专利权)人: | 武汉叶动力生物科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 42242 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人: | 廉海涛 |
地址: | 430000 湖北省*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 组织培养 植物组织培养 马铃薯幼苗 初代培养 生根培养 壮根 马铃薯 接种 生根 消毒 茎尖离体培养 马铃薯组培苗 初代培养基 生根培养基 双目解剖镜 脱毒试管苗 材料采集 茎尖剥离 培养条件 外层叶片 培养基 无菌苗 叶原基 单株 顶芽 茎尖 种薯 移栽 成活 优化 | ||
本发明涉及植物组织培养领域,具体地说是涉及一种促进马铃薯幼苗壮根的组织培养方法。本发明的组织培养方法包括以下步骤:(1)材料采集与消毒;(2)茎尖剥离:在双目解剖镜下,将消毒后的马铃薯顶芽剥去外层叶片,仅留1‑2个叶原基;(3)初代培养:将5‑6个大小为0.1‑0.2mm的茎尖接种在初代培养基上进行培养;(4)生根培养:将步骤(3)中无菌苗按单株接种于生根培养基中进行培养,即得脱毒试管苗;本发明的组织培养方法利用茎尖离体培养,克服了种薯用量大的问题;且本发明优化了初代培养和生根培养的培养基及培养条件,既能使马铃薯生根多、生根快,还能使马铃薯组培苗健壮,更易移栽成活。
技术领域
本发明涉及植物组织培养领域,具体地说是涉及一种促进马铃薯幼苗壮根的植物组织培养方法。
背景技术
植物组织培养技术是20世纪初发展起来的技术,是指在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞、原生质体等在合适的条件进行离体培养,诱导产生愈伤组织、不定芽等,之后形成完整植株的过程。组织培养技术因其具有可以利用各种人工培养条件控制细胞的生长、分化等优点,有力地推动了植物生理学、病理学、药学、遗传学、育种以及生物化学等学科的交叉发展,并广泛应用于农业、林业、园艺、工业、医药业等多种行业,产生巨大的经济效益和社会效益,归纳起来,有以下几个方面:1、苗木的离体快繁;2、培育脱毒苗;3、应用于植物育种如单倍体育种、原生质体融合、胚和胚乳的培养基转基因育种等;4、生产次生代谢产物如中药成分等;5、人工种子和种质保存;6、基因功能研究等。
马铃薯是一种分布广泛,适应性强、产量高、营养丰富的宜粮、宜菜、宜饲、宜做工业原料的高产经济作物,也是世界十大营养食品之一。马铃薯中含有蛋白质、碳水化合物、脂肪、钙、磷、锌、铁、硫胺素、核苷酸、维生素等。而且其含有丰富的氨基酸,备受当代营养食品发展的重视。此外,马铃薯还含有碳水化合物、脂肪、糖类、粗纤维、灰分和各种维生素等营养素,这些营养素对人体是不可缺少的物质。目前以马铃薯叶片、茎段、叶柄、根等多种外植体进行的再生植株培养,均采用多步成苗培养。而现在马铃薯的大田栽培主要是采用块茎繁殖,块茎繁殖有着诸多优势,但也存在明显的弊端,即种薯用量大、繁殖系数低和病毒易积累,导致了严重的品质退化。
而且组织培养所获得的试管苗往往长势较弱,根系不发达,移栽后成活率低,严重影响试管苗的培养效率和进一步的应用效果。因此,建立一种促进马铃薯细苗壮根的组织培养方法,就显得尤为重要。
发明内容
为了克服现有技术中存在的问题,本发明提出了一种促进马铃薯幼苗壮根的组织培养方法,该方法以茎尖离体培养,克服了种薯用量大的问题;且本发明优化了初代培养和生根培养的培养基及培养条件,既能使马铃薯生根多、生根快,还能使马铃薯组培苗健壮,更易移栽成活。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种促进马铃薯幼苗壮根的植物组织培养方法,包括以下步骤:
(1)材料采集与消毒:于6月份剪取田间生长旺盛的马铃薯苗顶芽,切去叶片,自来水冲洗40-50min,用无菌滤纸吸干水分,置于超净工作台上用75%酒精浸洗25s,再用0.1%升汞消毒3-6min,最后用无菌水冲洗7-8次,备用;
(2)茎尖剥离:在双目解剖镜下,将消毒后的马铃薯顶芽剥去外层叶片,仅留1-2个叶原基;
(3)初代培养:将5-6个大小为0.1-0.2mm的茎尖接种在初代培养基上进行培养;所述初代培养基组成为:在1/2MS培养基中添加6-BA、ZT、乙烯利和烯效唑,所述6-BA的终浓度为1.2-2.5mg/L,ZT的终浓度为0.08-0.18mg/L,乙烯利的终浓度为0.2-0.4mg/L,烯效唑的终浓度为0.1-0.2mg/L;
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