[发明专利]一种促进马铃薯幼苗壮根的植物组织培养方法有效

专利信息
申请号: 201810584849.6 申请日: 2018-06-06
公开(公告)号: CN108552059B 公开(公告)日: 2020-01-17
发明(设计)人: 陈道甫;林心灵;杨辉艳;马星;何子元 申请(专利权)人: 武汉叶动力生物科技有限公司
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 42242 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 代理人: 廉海涛
地址: 430000 湖北省*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 组织培养 植物组织培养 马铃薯幼苗 初代培养 生根培养 壮根 马铃薯 接种 生根 消毒 茎尖离体培养 马铃薯组培苗 初代培养基 生根培养基 双目解剖镜 脱毒试管苗 材料采集 茎尖剥离 培养条件 外层叶片 培养基 无菌苗 叶原基 单株 顶芽 茎尖 种薯 移栽 成活 优化
【说明书】:

发明涉及植物组织培养领域,具体地说是涉及一种促进马铃薯幼苗壮根的组织培养方法。本发明的组织培养方法包括以下步骤:(1)材料采集与消毒;(2)茎尖剥离:在双目解剖镜下,将消毒后的马铃薯顶芽剥去外层叶片,仅留1‑2个叶原基;(3)初代培养:将5‑6个大小为0.1‑0.2mm的茎尖接种在初代培养基上进行培养;(4)生根培养:将步骤(3)中无菌苗按单株接种于生根培养基中进行培养,即得脱毒试管苗;本发明的组织培养方法利用茎尖离体培养,克服了种薯用量大的问题;且本发明优化了初代培养和生根培养的培养基及培养条件,既能使马铃薯生根多、生根快,还能使马铃薯组培苗健壮,更易移栽成活。

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域,具体地说是涉及一种促进马铃薯幼苗壮根的植物组织培养方法。

背景技术

植物组织培养技术是20世纪初发展起来的技术,是指在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞、原生质体等在合适的条件进行离体培养,诱导产生愈伤组织、不定芽等,之后形成完整植株的过程。组织培养技术因其具有可以利用各种人工培养条件控制细胞的生长、分化等优点,有力地推动了植物生理学、病理学、药学、遗传学、育种以及生物化学等学科的交叉发展,并广泛应用于农业、林业、园艺、工业、医药业等多种行业,产生巨大的经济效益和社会效益,归纳起来,有以下几个方面:1、苗木的离体快繁;2、培育脱毒苗;3、应用于植物育种如单倍体育种、原生质体融合、胚和胚乳的培养基转基因育种等;4、生产次生代谢产物如中药成分等;5、人工种子和种质保存;6、基因功能研究等。

马铃薯是一种分布广泛,适应性强、产量高、营养丰富的宜粮、宜菜、宜饲、宜做工业原料的高产经济作物,也是世界十大营养食品之一。马铃薯中含有蛋白质、碳水化合物、脂肪、钙、磷、锌、铁、硫胺素、核苷酸、维生素等。而且其含有丰富的氨基酸,备受当代营养食品发展的重视。此外,马铃薯还含有碳水化合物、脂肪、糖类、粗纤维、灰分和各种维生素等营养素,这些营养素对人体是不可缺少的物质。目前以马铃薯叶片、茎段、叶柄、根等多种外植体进行的再生植株培养,均采用多步成苗培养。而现在马铃薯的大田栽培主要是采用块茎繁殖,块茎繁殖有着诸多优势,但也存在明显的弊端,即种薯用量大、繁殖系数低和病毒易积累,导致了严重的品质退化。

而且组织培养所获得的试管苗往往长势较弱,根系不发达,移栽后成活率低,严重影响试管苗的培养效率和进一步的应用效果。因此,建立一种促进马铃薯细苗壮根的组织培养方法,就显得尤为重要。

发明内容

为了克服现有技术中存在的问题,本发明提出了一种促进马铃薯幼苗壮根的组织培养方法,该方法以茎尖离体培养,克服了种薯用量大的问题;且本发明优化了初代培养和生根培养的培养基及培养条件,既能使马铃薯生根多、生根快,还能使马铃薯组培苗健壮,更易移栽成活。

本发明是通过以下技术方案实现的:

一种促进马铃薯幼苗壮根的植物组织培养方法,包括以下步骤:

(1)材料采集与消毒:于6月份剪取田间生长旺盛的马铃薯苗顶芽,切去叶片,自来水冲洗40-50min,用无菌滤纸吸干水分,置于超净工作台上用75%酒精浸洗25s,再用0.1%升汞消毒3-6min,最后用无菌水冲洗7-8次,备用;

(2)茎尖剥离:在双目解剖镜下,将消毒后的马铃薯顶芽剥去外层叶片,仅留1-2个叶原基;

(3)初代培养:将5-6个大小为0.1-0.2mm的茎尖接种在初代培养基上进行培养;所述初代培养基组成为:在1/2MS培养基中添加6-BA、ZT、乙烯利和烯效唑,所述6-BA的终浓度为1.2-2.5mg/L,ZT的终浓度为0.08-0.18mg/L,乙烯利的终浓度为0.2-0.4mg/L,烯效唑的终浓度为0.1-0.2mg/L;

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